[發(fā)明專利]輔助診斷結(jié)直腸癌的組合物、試劑盒及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010892075.0
• 申請日: 2020-08-31
• 公開（公告）號: CN111748636B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戴立忠;周镕;紀博知;劉佳
• 申請（專利權(quán)）人: 圣湘生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京派特恩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270
• 代理人: 劉欣;張穎玲

1.一種輔助診斷結(jié)直腸癌的組合物，所述組合物包括：

檢測Septin9基因甲基化的引物：

正向引物SEQ ID NO:1：

5’-GCGGGAACCTGATCCGCCCGGGAGGCGGGG-3’；

反向引物SEQ ID NO:2：

5’-CCTGGCTCAGCTGAATGAATGGGGGAGG-3’；

檢測Septin9基因甲基化的熒光探針：

熒光探針SEQ ID NO:3：5’ -AGGGGCCGGCGCCCGCCTTC-3’；

檢測NDRG4基因甲基化的引物：

正向引物SEQ ID NO:4：5’ -GGATATTTTTGTTAGGGGATGTTTT-3’；

反向引物SEQ ID NO:5：5’-CTCCCAAAAAAAACCTTAAACCTAC-3’；

檢測NDRG4基因甲基化的熒光探針：

熒光探針SEQ ID NO:6：5’ -TAAGGATATTTTCGGG-3’；

檢測SDC2基因甲基化的引物：

正向引物SEQ ID NO:7：5’-GGGAGTGTAGAAATTAATAAGTGAGAG-3’；

反向引物SEQ ID NO:8：5’-ACCAAACCCAAAATAAACAAAATC-3’；以及

檢測SDC2基因甲基化的熒光探針：

熒光探針SEQ ID NO:9：5’-CCCCGAGCCCGAGTCCCCGAGC-3’。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，所述熒光探針的熒光報告基團互不干擾。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中，所述組合物進一步包括阻斷探針。

4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中，所述阻斷探針SEQ ID NO:10為5’-TGGTGCCTGCCTTCCTCCCC-3’。

5.根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項所述的組合物，其中，所述組合物進一步包括用于監(jiān)控的內(nèi)標上游引物、內(nèi)標下游引物和內(nèi)標探針。

6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其中，所述組合物包括如SEQ ID NO:11所示的內(nèi)標上游引物、如SEQ ID NO:12所示的內(nèi)標下游引物，和如SEQ ID NO:13所示的內(nèi)標探針。

7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物，其中，如SEQ ID NO:3所示的Septin9基因熒光探針的熒光報告基團為FAM；如SEQ ID NO:6所示的NDRG4基因熒光探針的熒光報告基團為VIC；如SEQ ID NO:9所示的SDC2基因熒光探針的熒光報告基團為ROX；如SEQ ID NO:13所示的內(nèi)標熒光探針的熒光報告基團為CY5。

8.權(quán)利要求1~7中任一項所述的組合物在制備輔助診斷結(jié)直腸癌的試劑盒中的用途。

9.一種輔助診斷結(jié)直腸癌的試劑盒，所述試劑盒包括權(quán)利要求1~7中任一項所述的組合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括其余PCR所需試劑。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的試劑盒，其中，所述其余PCR所需試劑為核酸釋放試劑、dNTP、DNA聚合酶、UDG酶、PCR緩沖液以及Mg²⁺中的至少一種。