[發明專利]一種發酵法與酶法聯合制備貝類高F值寡肽的方法

有效

• 申請號: 202010891927.4
• 申請日: 2020-08-31
• 公開（公告）號: CN111979286B
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 劉海梅;曹亞男;裴繼偉;趙芹;張莉莉;孫雪梅;牛麗紅;劉兆勝
• 申請（專利權）人: 魯東大學;山東深海生物科技股份有限公司;煙臺市海洋經濟研究院（煙臺市海洋科學技術研究所;煙臺市漁業技術推廣站;煙臺市水生動物疫病防控中心）
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12R1/225
• 代理公司: 煙臺上禾知識產權代理事務所(普通合伙) 37234
• 代理人: 毛毛

1.一種發酵法與酶法聯合制備貝類高F值寡肽的方法，包括內切酶酶解與外切酶酶解，其特征在于，在外切酶酶解的過程中使用瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)；

所述的內切酶為胃蛋白酶；

所述的外切酶為風味蛋白酶；

所述的瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)保藏編號為CICC 22536，獲得自中國工業微生物菌種保藏管理中心；

所述的方法包括如下步驟：

(1)將去殼貝肉破碎，并與水混合，得料漿；

(2)將內切酶加入步驟(1)獲得的料漿中，進行酶解；

(3)調節步驟(2)獲得的體系的pH值為6-8，加入外切酶、培養基和瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)，在35-45℃條件下培養20-30h；滅菌滅酶，離心分離，得發酵液；所述的培養基料包括以料漿計：15-20g/L葡萄糖、16-22g/L牛肉浸膏、6-10g/L MnSO₄、2.5-4g/L十二烷基硫酸鈉、10-14g/L CaCO₃；

(4)對發酵液進行超濾去除大分子蛋白。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，內切酶的用量為以去殼貝肉計500-800U/g。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)的酶解條件為：調節pH值為2-3.5，在35-45℃條件下酶解6-9h。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，外切酶的用量為以去殼貝肉計300-500U/g。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)的用量為以料漿體積計5×10⁷-9×10⁷cfu/mL。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，去殼貝肉與水的質量比為1：(3-5)。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，超濾使用的濾膜的截留分子量為10KD。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，超濾去除大分子蛋白后，使用大孔樹脂進行脫色。