[發(fā)明專(zhuān)利]表達(dá)抗CD22嵌合抗原受體和PD-L1阻斷蛋白的細(xì)胞的制備方法、表達(dá)載體及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010891848.3
• 申請(qǐng)日: 2020-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111944850B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙琦;劉婕
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 澳門(mén)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/867
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/867;C12N15/62;C12N15/12;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 成都超凡明遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51258
• 代理人: 王暉;劉書(shū)芝

1.一種藥物組合物，其特征在于，其包括

-表達(dá)載體或細(xì)胞，

-可溶性的單克隆抗體，以及

- 藥學(xué)上可接受的賦形劑，

其中，所述表達(dá)載體插入有編碼抗CD22嵌合抗原受體的第一核酸和編碼PD-L1阻斷蛋白的第二核酸；所述PD-L1阻斷蛋白為缺乏PD-1跨膜區(qū)和胞內(nèi)信號(hào)區(qū)的PD-L1，所述抗CD22嵌合抗原受體的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述PD-L1阻斷蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，

所述細(xì)胞通過(guò)如下步驟制備：將所述表達(dá)載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞以得到所述細(xì)胞，以及

所述可溶性的單克隆抗體是抗人PD-L1抗體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述第一核酸的核苷酸序列如SEQID NO.3所示，所述第二核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述表達(dá)載體為慢病毒表達(dá)載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，所述慢病毒表達(dá)載體為pLVX-IRES-Zsgreen慢病毒表達(dá)載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，在所述表達(dá)載體上，所述第一核酸和所述第二核酸均串聯(lián)有跨膜結(jié)構(gòu)域。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述跨膜結(jié)構(gòu)域選自T細(xì)胞受體亞基，CD4，CD8或CD28的跨膜結(jié)構(gòu)域。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述T細(xì)胞受體亞基為α亞基、β亞基或δ亞基。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述表達(dá)載體上還包括：胞外結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于，所述胞外結(jié)構(gòu)域包括鉸鏈；所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域包括共刺激信號(hào)分子和胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述鉸鏈來(lái)自CD8α；

所述共刺激信號(hào)分子選自人4-1BB的共刺激信號(hào)分子、CD27、PD1、ICOS、OX40或B7-H3；所述胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域?yàn)槿薈D3ζ信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域，CD3γ，CD5或CD3ε。

11.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為T(mén)細(xì)胞。

12.一種如權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤為PD-L1陽(yáng)性或CD22陽(yáng)性的腫瘤；所述腫瘤為如下腫瘤中的任意一種：淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、白血病和多發(fā)性骨髓瘤。