[發明專利]一種具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽的制備方法

有效

• 申請號: 202010891460.3
• 申請日: 2020-08-30
• 公開（公告）號: CN112094880B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 孫術國;羅章;楊飛艷
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學;西藏農牧學院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14
• 代理公司: 湖南企企衛知識產權代理有限公司 43257
• 代理人: 張慧

一種具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽的制備方法，包括以下步驟：取牦牛奶渣粉，按料液比1：3～5g/ml加入蒸餾水，得底物，往底物中加入復合酶，超聲破碎，酶解，沸水浴滅酶，離心，取上清液進行冷凍干燥，即得具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽。所得多肽能有效清除超氧陰離子、羥基自由基、DPPH自由基，而且具有與鐵離子螯合的能力，同時具有很好的過氧化氫清除能力。本發明提供的牦牛奶渣多肽富集抗氧化活性成分，可用于藥品制備。此外，本發明不僅響應了國家變廢為寶的策略，且方法操作簡單，生產成本低，對新型抗氧化保健品和食品添加劑開發與應用具有重要價值。

技術領域

本發明涉及一種具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽的制備方法，涉及生物工程技術領域。

背景技術

奶渣是將牦牛全乳提制酥油后的脫脂乳加熱處理后，再加入皺胃酶或酸奶后經過濾、曬干而成。牦牛奶渣質地堅硬呈碎渣狀，易于保存，有著豐富的蛋白質、16種氨基酸、鈣、鐵、維生素、乳糖，脂肪含量低，具有巨大的市場潛力和發展前景，是高原牧民重要的食物蛋白來源之一，在野外放牧生活中十分方便。但目前奶渣的研究及產品開發有限，除自食與送與賓客以外，多用于飼養牲畜，利用價值較低，工業化生產更是少之又少，只有極少數轉化為經濟來源。

CN110904176A公開了一種北芪菇蛋白源抗氧化肽的制備方法，CN106317170B公開了一種紫蘇籽抗氧化肽及其應用，序列為Tyr-Leu(YL)。這些方案中不乏存在具有抗氧化活性的多肽，但來源對象多為肉源蛋白肽和植物源蛋白肽，乳制品類蛋白肽卻鮮少。

另一方面，在將牦牛乳制成酥油過程中，不可避免的產生大量奶渣，這些奶渣含有豐富的蛋白質及其他營養物質，目前由于技術的限制，這些奶渣蛋白并沒有被充分利用，造成資源的浪費。

發明內容

本發明要解決的技術問題是，克服現有技術的不足，提供一種工藝簡單的具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽的制備方法。

本發明解決其技術問題采用的技術方案是，一種具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽的制備方法，包括以下步驟：

取牦牛奶渣粉，按料液比1：3～5g/ml加入蒸餾水，得底物，往底物中加入復合酶，均質(均質轉速優選10000轉/min，時間優選5min)，37～38℃水浴酶解2～4h，酶解1～2次，沸水浴10min以上滅酶，離心，取上清液進行冷凍干燥(優選冷凍干燥溫度-40℃,干燥48h)，即得具有抗氧化活性的牦牛奶渣多肽。

進一步，復合酶為胃蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶。優選胃蛋白酶和胰蛋白酶的質量比為1︰0.8～1.2。復合酶與底物的質量之比為1：80～120。

胃蛋白酶的效能為1：30000，胰蛋白酶的酶活為大于250USP u/mg。

離心的條件為12000～15000rpm/min離心20～30min。優選12000rpm/min離心20min。

胃蛋白酶、胰蛋白酶是常用的蛋白質降解酶，主要來源于動物。用胃蛋白酶+胰蛋白酶酶解得到的奶渣多肽，可防止奶渣多肽進入體內被小腸和胃部所吸收，從而達到抗氧化的效果，具有使用安全、量少、酶解效果好等優點，并在肉類、植物類、水產品、乳制品等中得到廣泛應用。

本發明方法簡單，所得多肽具有較強的抗氧化活性，并且可以將該多肽應用于保健食品和藥品的開發與研究。而且本發明的原料是現有技術中不能加以高價值應用的奶渣，資源得到最有效的應用。

所得多肽能有效清除超氧陰離子、羥基自由基、DPPH自由基，而且具有與鐵離子螯合的能力，同時具有很好的過氧化氫清除能力。本發明提供的牦牛奶渣多肽富集抗氧化活性成分，可用于藥品制備。此外，本發明不僅響應了國家變廢為寶的策略，且方法操作簡單，生產成本低，對新型抗氧化保健品和食品添加劑開發與應用具有重要價值。

附圖說明

圖1是實施例中所得多肽對DPPH自由基清除活性的作用效果圖；