[發明專利]基于炙甘草制備甘草次酸及其衍生物的方法和用途

有效

• 申請號: 202010889918.1
• 申請日: 2020-08-28
• 公開（公告）號: CN112176018B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 解偉松;董芳;徐巧環
• 申請（專利權）人: 河北仁心藥業有限公司
• 主分類號: C12P33/06
• 分類號: C12P33/06;C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08;C07H1/00;A61K31/7034;A61P35/00
• 代理公司: 北京睿博行遠知識產權代理有限公司 11297
• 代理人: 龔家驊

1.一種基于炙甘草制備甘草次酸的方法，包括：

微波法提取甘草酸，取粉碎的灸甘草，先加乙醇微波提取兩次，再加水微波提取兩次；

酶法制備甘草次酸，取所述甘草酸，用醋酸緩沖溶液配制底物溶液，加入酶、乙酰左旋肉堿進行反應；接著加入氫氧化鈉溶液終止反應；酸沉、離心、水洗、離心，接著乙醇溶解，加水靜置，離心干燥、重結晶得到甘草次酸；

所述酶為β-葡萄糖醛酸苷酶，乙酰左旋肉堿的加入量為0.3～0.5mol/L。

2.根據權利要求1所述的一種基于炙甘草制備甘草次酸的方法，其特征在于：所述酶法制備甘草次酸的具體條件為：酶與底物的體積比為1：1～3，溫度為37～40℃，pH為5.0～5.5，反應5～6h；其中，底物溶液濃度為2～3g/L。

3.一種甘草次酸衍生物，其結構選自以下化合物：

4.權利要求3所述的一種甘草次酸衍生物的制備方法，包括：

S1：將權利要求1所述的甘草次酸溶于無水乙醇中，加入鋅粉，加熱回流，依次滴入濃鹽酸、無水乙醇；過濾、收集濾液冷至室溫；加入蒸餾水、水浴加熱、抽濾、重結晶后得11-脫氧甘草次酸；

S2：取所述11-脫氧甘草次酸溶于DMF中，加入烯丙基溴、DBU；反應完全后濃縮、硅膠柱層析得到白色固體A；

S3：取芪苷化合物加入吡啶，攪拌、冰水浴條件下加入苯甲酰氯，反應后倒入水中，靜置、洗滌、干燥，得到固體，溶于DMF中，冰浴條件下加入冰乙酸、水合肼，反應后加入乙酸乙酯，洗滌、干燥、過濾、旋蒸、柱層析分離，得固體溶于二氯甲烷中，加入三氯乙腈、DBU，攪拌、硅膠柱層析得到固體B；

S4：取固體B溶于無水二氯甲烷中，攪拌，加入所述白色固體A，冰鹽浴條件下加入TMSOTf，攪拌反應、硅膠柱層析得到固體C；

S5：取固體C加入二氯甲烷/甲醇的混合溶液，調pH、攪拌；加入陽離子交換樹脂，過濾，硅膠柱層析，得到固體溶于無水甲醇中，加入二氯化鈀，攪拌、硅藻土助濾、硅膠柱層析，得到甘草次酸衍生物；

所述芪苷化合物為虎杖苷、土大黃苷和白皮杉醇-3′-O-葡萄糖苷中的一種。

5.根據權利要求4所述的一種甘草次酸衍生物的制備方法，其特征在于：所述步驟S2中11-脫氧甘草次酸與烯丙基溴、DBU的固液比為3.8～4g：0.9～1mL：0.5～0.6mL；

所述步驟S3中芪苷化合物與苯甲酰氯的固液比為1g：4～5mL；三氯乙腈、DBU體積比為12～13：1；

所述步驟S4中固體B與固體A的質量比為1：2～3；固體B與TMSOTf的固液比為5～6g：0.1mL；

所述步驟S5中二氯甲烷/甲醇的混合溶液中二氯甲烷與甲醇的體積比為1：1～1.2，pH值為10～10.5。

6.權利要求4～5中任一項所述的制備方法獲得的甘草次酸衍生物在制備抗肝癌藥物中的用途。