[發明專利]基于炙甘草制備甘草次酸及其衍生物的方法和用途

有效

• 申請號: 202010889918.1
• 申請日: 2020-08-28
• 公開（公告）號: CN112176018B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 解偉松;董芳;徐巧環
• 申請（專利權）人: 河北仁心藥業有限公司
• 主分類號: C12P33/06
• 分類號: C12P33/06;C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08;C07H1/00;A61K31/7034;A61P35/00
• 代理公司: 北京睿博行遠知識產權代理有限公司 11297
• 代理人: 龔家驊

本發明公開了一種基于炙甘草制備甘草次酸及其衍生物的方法和用途，涉及藥物化學技術領域。基于灸甘草制備甘草酸的具體為：微波法提取甘草酸，接著酶法分解甘草酸制備甘草次酸，產物得率高。然后利用上述甘草次酸與芪苷化合物復合制得甘草次酸衍生物，兩者協同作用，使其具有更高的生物利用度和細胞吸收效率，對癌細胞具有明顯的抑制作用；且具有更低的甘草次酸衍生物的藥物用量以及不良反應率。整個反應過程，反應條件溫和，在室溫下均可反應，產物收率較高。

技術領域

本發明屬于藥物化學技術領域，具體涉及基于炙甘草制備甘草次酸及其衍生物的方法和用途。

背景技術

甘草(Glycyrrhiza Root)始載于《神農本草經》，《傷寒論》的110個處方中有74個處方用到甘草，可見甘草是一味重要的傳統中藥。甘草性平味甘，具有和中緩急、潤肺、解毒、祛痰、止咳、通經脈、利氣血、調和諸藥等功效，甘草的主要活性成分為甘草酸和甘草次酸。灸甘草，以生甘草用蜂蜜炒至甘草呈金黃色而得。為類圓形或橢圓形切片，表面紅棕色或灰棕色，微有光澤，切面黃色至深黃色，形成層環明顯，射線放射狀。質稍粘，具焦香氣，味甜。

甘草次酸又稱甘草亭酸，它是由甘草酸水解得到的五環三萜類化合物，其中以18β-甘草次酸為主。研究表明，甘草次酸具有抗炎、抗潰瘍、抗病毒、降血脂、保護心肌和治療缺血性心肌炎、清除體內自由基、促進胰島素吸收、抗癌及防癌等多種藥理活性。甘草次酸在臨床上的應用主要以其糖苷甘草酸的形式口服或注射給藥，體內代謝為甘草次酸發揮藥效。甘草酸口服給藥后，依賴胃酸和腸道內的正常菌群水解代謝成甘草次酸后吸收入血發揮藥效。甘草酸注射給藥后，首先在肝細胞酶體中的β-D-葡萄苷酸酶代謝成3-單-葡萄苷酸甘草次酸，進一步在肝臟中代謝，并隨膽汁排入腸內，形成肝腸循環，由腸內細菌代謝成甘草次酸，再吸收入血。

然而，由于甘草次酸的水溶性差，導致其生物利用度差，臨床應用需要大劑量，而長期大量用藥則會引起藥源性高血壓和水腫等不良反應。因此，對甘草次酸進行結構修飾，提高其生物利用度和藥理活性，減少藥物用量，避免不良反應是非常有必要的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于炙甘草制備甘草次酸及其衍生物的方法和用途，該甘草次酸的制備具有較高的產率，制得的甘草次酸衍生物生物活性高，對癌細胞具有較好的抑制作用，且不良反應率低。

本發明為實現上述目的所采取的技術方案為：

一種基于炙甘草制備甘草次酸的方法，包括：

微波法提取甘草酸，取粉碎的灸甘草，依次加乙醇、水，微波提取各兩次；

酶法制備甘草次酸，取上述甘草酸，用醋酸緩沖溶液配制底物溶液，加入酶、乙酰左旋肉堿進行反應；接著加入氫氧化鈉溶液終止反應；酸沉、離心、水洗、離心，接著乙醇溶解，加水靜置，離心干燥、重結晶得到甘草次酸。本發明所用灸甘草由甘草炮制而得，相比于傳統制備工序，提前用蜂蜜浸泡甘草，加工時間短，蜂蜜滲入效果較好，進一步增強灸甘草中甘草苷、甘草酸的穩定性及含量；提取甘草酸后利用酶法制備甘草次酸，反應條件溫和、無污染、反應速率快，化學鍵選擇性好；乙酰左旋肉堿是存在于體內的一種自然物質，可作用于酶的活性位點增強酶的活性；且可與底物的水解產物葡萄糖醛酸結合，降低產物抑制效應，進而提高了酶促反應，進一步提升酶的活性，促進甘草酸的轉化效率，提高產率。

優選地，微波法提取甘草酸的實驗條件具體為：微波功率320～350W，溫度為60～70℃。

優選地，酶法制備甘草次酸的具體條件為：酶與底物的比例為1：1～3，溫度為37～40℃，pH為5.0～5.5，反應5～6h；其中酶為β-葡萄糖醛酸苷酶，底物溶液濃度為2～3g/L，乙酰左旋肉堿的加入量為0.3～0.5mol/L。

本發明又一目的在于公開了基于灸甘草制備甘草次酸在甘草酸衍生物制備中應用。

一種甘草次酸衍生物，其結構式如以下通式I所示：