[發(fā)明專利]化學(xué)發(fā)光免疫磁球及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010875920.3
• 申請(qǐng)日: 2020-08-28
• 公開（公告）號(hào): CN112034164B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李重陽;來祥兵;王鐸;張雪嬌;舒芹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢生之源生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/546
• 分類號(hào): G01N33/546;G01N33/543;G01N21/76;C08F212/08;C08F220/18;C08F222/14;C08K3/22;C08J3/12;C08J7/12
• 代理公司: 武漢智嘉聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 42231
• 代理人: 易賢衛(wèi)

本發(fā)明闡述了一種化學(xué)發(fā)光免疫磁性微球，包括有表面化學(xué)修飾有對(duì)甲苯磺酰化基團(tuán)的磁性微球，同抗原或抗體偶聯(lián)所得。還公開了該化學(xué)發(fā)光免疫磁性微球的制備方法，包括：聚合以獲得表面具有多孔結(jié)構(gòu)的聚苯乙烯的乳膠粒子；乳膠粒子與亞鐵鹽的水溶液混合，通過原位還原法制備磁性復(fù)合體；將磁性復(fù)合體經(jīng)羥基化改性，得到羥基化磁性微球；將羥基化磁性微球與對(duì)甲苯磺酰氯反應(yīng)，即得到對(duì)甲苯磺酰化磁性微球。運(yùn)用本發(fā)明的技術(shù)所制備對(duì)甲苯磺酰化磁性微球?qū)贵w的偶聯(lián)率高，其偶聯(lián)后得到的化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)磁珠粒徑均勻磁響應(yīng)性好，用于發(fā)光檢測(cè)的準(zhǔn)確度高，熱穩(wěn)定性高，能夠滿足臨床使用需求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于功能材料和分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及化學(xué)發(fā)光免疫磁球及其制備方法。

背景技術(shù)

化學(xué)發(fā)光免疫磁性微球，其采用的磁性微球作為載體，與其它固相萃取材料相比，磁性材料具有超順磁特性、尺寸小、表面積大等優(yōu)點(diǎn)，它在溶液中可以充分與分析物接觸以保證高效吸附。磁性材料能夠快速與母液分離；磁性材料也可以直接用于含固體顆粒、微生物或者粘度大的復(fù)雜樣品前處理，中間不需要過濾和離心等步驟。然而，單純的磁性材料其吸附能力有限，需要在其表面進(jìn)行適當(dāng)?shù)男揎椧蕴岣哌x擇性和吸附性能。常用的修飾基團(tuán)包括C18、苯基、氨基、聚合物，然而對(duì)其進(jìn)行修飾，往往造成其偶聯(lián)抗原或抗體的效率不高，在后續(xù)的檢測(cè)和分析過程中，準(zhǔn)確度不高，熱穩(wěn)定性欠缺。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明制備的化學(xué)發(fā)光免疫磁性微球，而且偶聯(lián)抗原抗體后的免疫磁珠用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)準(zhǔn)確度高，熱穩(wěn)定性佳。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的一方面，提供一種化學(xué)發(fā)光免疫磁性磁球，包括由表面化學(xué)修飾有對(duì)甲苯磺酰化基團(tuán)的磁性微球，同抗原或抗體偶聯(lián)所得。

進(jìn)一步的，所述磁性微球?yàn)榫郾揭蚁┐判晕⑶颉?/p>

本發(fā)明的另一方面，提供一種化學(xué)發(fā)光免疫磁球的制備方法，包括以下步驟：

S1、聚合以獲得表面具有多孔結(jié)構(gòu)的聚苯乙烯的乳膠粒子；

S2、將S1步驟得到的乳膠粒子與亞鐵鹽的水溶液混合，通過原位還原法制備磁性復(fù)合體；

S3、將磁性復(fù)合體經(jīng)羥基化改性，得到羥基化磁性微球；

S4、將羥基化磁性微球與對(duì)甲苯磺酰氯反應(yīng)，即得到對(duì)甲苯磺酰化磁性微球；

S5、將所述對(duì)甲苯磺酰化磁性微球與抗原或抗體混合，反應(yīng)6～8h，得到所述化學(xué)發(fā)光免疫磁球。

具體的，所述S1步驟包括以下步驟：

S11、種子乳液的制備

取乳化劑、蒸餾水、單體有機(jī)相和引發(fā)劑聚合得到種子乳液；

S12、單體的預(yù)乳化

將乳化劑與單體有機(jī)相混合，充分?jǐn)嚢柚馏w系呈現(xiàn)穩(wěn)定的乳液，即得到單體的預(yù)乳化液；

S13、乳膠粒子的制備

將引發(fā)劑和單體的預(yù)乳化液同時(shí)滴入到種子乳液中；升高溫度至84～86℃熟化處理；降低溫度至40～45℃，調(diào)節(jié)pH呈弱堿性，得到乳液；將所得乳液過篩，即可得到聚苯乙烯的乳膠粒子。

具體的，所述S11的步驟中，單體有機(jī)相:水:乳化劑:引發(fā)劑的體積配比為100:(500～1500):(1～3):(1～5)。

具體的，所述S3步驟包括以下步驟：

S31、磁性復(fù)合體與環(huán)氧基聚硅氧烷混合，在冰浴并攪拌條件下，勻速滴加冰醋酸，滴加完畢后，攪拌反應(yīng)；