[發明專利]一種冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 202010875455.3
• 申請日: 2020-08-27
• 公開（公告）號: CN112083091B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 周厚成;胡昌江;李莎;鄭傳奎;吳琴;周維;姚麗琴
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 向丹

為建立準確度和精密度高且快速評價冬凌草配方顆粒內在質量的方法，本發明提供了一種冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜，構建該UPLC特征圖譜的方法以及該UPLC特征圖譜在冬凌草甲素檢測中的應用，通過UPLC特征圖譜的構建及使用，為冬凌草配方顆粒提供一種全面、快速、有效的內在質量檢測方法，具有操作簡單、穩定可靠、精密度高的特點。

技術領域

本發明屬于中藥材檢測技術領域，具體的說，是一種冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜及其構建方法和應用。

背景技術

中藥配方顆粒是由單味中藥飲片經水提、分離、濃縮、干燥、制粒而成的顆粒，失去了原有飲片的形態學特征，其真偽鑒別和優劣評價一直是制約行業發展的瓶頸。因此，建立關聯功效、兼具指紋特征的中藥配方顆粒質量評價體系，全面反映和有效控制配方顆粒的內在品質，是當前急需解決關鍵問題之一。

冬凌草，學名碎米椏（Rabdosia rubescens (Hemsl.) Hara），是唇形科香茶菜屬植物。主要分布于中國湖北，四川，貴州，廣西，陜西等地，具有清熱解毒、抗菌消炎、消腫止痛、抗腫瘤等作用。冬凌草化學成分復雜，經研究發現，其主要活性成分冬凌草甲素具有明顯的抗腫瘤和抗菌活性，臨床上主要用于治療急、慢性咽喉炎及扁桃體炎等癥，除此之外，冬凌草甲素還具有一定的治療肝癌、食管癌及胰腺癌的藥理作用。因此，鑒于冬凌草豐富的資源優勢和良好的藥理活性，開發和利用冬凌草中藥材的前景十分廣闊。

趙鵬等在“UPLC測定超聲提取冬凌草中冬凌草甲素的含量”《中成藥》2011年3月，第33卷第3期，540-542，中公開了采用超高效液相色譜法測定冬凌草中冬凌草甲素的方法，該方法公開了以甲醇為溶劑，超聲提取40min，提取液經0.22μm濾膜過濾后，采用WatersAcquity UPLC BEH C₁₈色譜柱（2.1mm×50mm，1.7μm），乙腈-水為流動相梯度洗脫，流速為0.4ml/min，柱溫40℃，PDA檢測器于242nm波長下對冬凌草甲素的含量進行測定。結果顯示，冬凌草甲素在0.022～0.44μg范圍內有良好的線性關系（r=0.9997）,平均回收率為97.3%，RSD1.05%。由此可以知道，現有技術已經公開了UPLC在建立冬凌草藥材中冬凌草甲素的質量控制過程中的快速準確的測定方法，但對于冬凌草配方顆粒而言，已經不具備飲片性狀鑒別的特征，因此，建立UPLC特征圖譜對冬凌草配方顆粒具有鑒別意義 。

發明內容

為建立準確度和精密度高且快速評價冬凌草配方顆粒內在質量的方法，本發明提供了一種冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜，構建該UPLC特征圖譜的方法以及該UPLC特征圖譜在冬凌草甲素檢測中的應用，通過UPLC特征圖譜的構建及使用，為冬凌草配方顆粒提供一種全面、快速、有效的內在質量檢測方法，具有操作簡單、穩定可靠、精密度高的特點。

本發明通過下述技術方案實現：一種冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜的構建方法，包括以下步驟：

（1）分別制備冬凌草配方顆粒的供試品溶液、冬凌草對照藥材的參照物溶液以及冬凌草甲素的對照品參照物溶液；

（2）取步驟（1）制得的供試品溶液和參照物溶液進行超高效液相色譜測定，得到對應的特征圖譜；

（3）以步驟（2）中參照物溶液的特征圖譜為參照圖譜，從供試品溶液的特征圖譜中選擇共有峰，構建冬凌草配方顆粒的UPLC特征圖譜。

所述步驟（1）中，取冬凌草配方顆粒用70%甲醇溶解后，超聲處理15～45min，放冷至20～30℃，搖勻后濾過，取續濾液，即得冬凌草配方顆粒的供試品溶液。

所述步驟（1）中，取冬凌草對照藥材用70%甲醇溶解后，超聲處理15～45min，放冷至20～30℃，搖勻后濾過，取續濾液，即得冬凌草對照藥材的參照物溶液。

所述步驟（1）中，在冬凌草甲素中加入甲醇制成每1ml含冬凌草甲素60μg的冬凌草甲素的對照品參照物溶液。