[發明專利]一種測定嬰幼兒奶粉中鏈格孢霉毒素殘留的方法

在審

• 申請號: 202010868486.6
• 申請日: 2020-08-26
• 公開（公告）號: CN111999406A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 邢家溧;張子庚;鄭睿行;毛玲燕;徐曉蓉;承海;路靜萍;林津如
• 申請（專利權）人: 寧波市食品檢驗檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 仇鈺瑩

本發明公開了一種測定嬰幼兒奶粉中鏈格孢霉毒素殘留的方法，屬于食品安全檢測技術領域。所述方法包括下列步驟：(1)樣品制備；(2)固相萃取；(3)液相色譜檢測。本發明提供的方法應用于實際樣品的檢測，結果顯示，該方法操作簡便、靈敏度強，重現性好，準確性高，完全可以滿足日常對于鏈格孢霉毒素的檢測要求。

技術領域

本發明涉及一種測定嬰幼兒奶粉中鏈格孢霉毒素殘留的方法，屬于食品安全檢測技術領域。

背景技術

歐盟食品安全局(European Food Safety Authority,EFSA)最新膳食暴露風險評估報告表明，低幼齡童對鏈格孢霉毒素的膳食暴露量最大，考慮到嬰幼兒奶粉因其配料植物油易受到鏈格孢霉毒素污染，以及在嬰幼兒膳食中的重要貢獻，而成為重點關注的食品。

目前已鑒明的鏈格孢霉毒素約有70余種，從結構上區分主要可分為5類：第一類為二苯并吡喃酮類及其衍生物，主要包括鏈格孢酚(Alternariol，AOH)、交鏈格孢酚單甲醚(Alternariol mono-methyl ether，AME)和交鏈孢烯(Altenuene，ALT)；第二類為四氨基酸衍生物類，代表毒素為細交鏈格孢菌酮酸(Tenuazonic acid，TeA)及異細交鏈孢菌酮酸(iso-tenuazonic acid，iso-TeA)；第三類為二萘嵌苯醌類，包括ATX-I、ATX-II、ATX-III等一類衍生物；第四類為丙三羧酸酯類化合物，即AAL毒素，又可分為AAL-TA和AAL-TB兩大類；第五類為包括騰毒素(Tentoxin，Ten)在內的其它結構類型。

鏈格孢霉毒素是一類重要的真菌毒素，但其限量標準目前仍未出臺，導致該毒素檢測技術發展較為緩慢。目前鏈格孢霉毒素的前處理方法通常采用QuEChERs法，但是對于奶粉基質，因其成分復雜，QuEChERs法在奶粉基質檢測鏈格孢霉毒素的回收率效果不佳，并不適用于在奶粉基質中鏈格孢霉毒素的檢測。因此，亟需尋找一種適用于在奶粉基質中鏈格孢霉毒素的檢測方法。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種嬰幼兒奶粉中7種鏈格孢霉毒素的液相色譜-串聯質譜檢測方法。

本發明披露了一種提取奶粉中鏈格孢霉毒素的前處理方法，所述方法包括以下步驟：

(1)提取：將奶粉放置于容器中，加入提取劑進行提取，取上清液后，氮吹；

(2)固相萃取：將步驟(1)氮吹后得到的溶液進行固相萃取，過膜；

所述步驟(1)中提取劑包含乙腈，所述提取劑中乙腈的體積百分數為70％～90％(v/v)；所述步驟(2)固相萃取后無需進行濃縮步驟。

在本發明一種實施方式中，所述鏈格孢霉毒素包括騰毒素(Ten)、交鏈孢烯(ALT)、交鏈格孢酚單甲醚(AME)、鏈格孢酚(AOH)、細交鏈格孢菌酮酸(TeA)、細格菌素(ATS)和/或鏈格孢菌毒素I(ATX-I)。

在本發明一種實施方式中，所述提取劑中還包括甲酸，甲酸的體積濃度為1-5％。

在本發明一種實施方式中，所述提取分為三次提取，三次提取劑均為乙腈水溶液，乙腈的體積百分數為70％～90％。

在本發明一種實施方式中，所述提取分為三次提取，三次提取劑中前兩次為乙腈水溶液，乙腈的體積百分數為70％～90％；第三次提取劑為乙腈甲醇水溶液，乙腈、甲醇和水的體積比為(40-50)：(10-30)：(20-50)。

優選地，前兩次提取液甲酸-乙腈-水溶液中甲酸的體積濃度為2％，乙腈的體積濃度為84％；第三次提取液甲酸-乙腈-甲醇-水溶液中甲酸的體積濃度為2％，乙腈的體積濃度為45％，甲醇的體積濃度為10％。

在本發明一種實施方式中，所述固相萃取條件為：固相萃取柱為HLB小柱，洗脫液為甲醇和乙腈。