[發明專利]引物對探針組合產品、試劑盒及其在檢測腸道病毒中的應用

在審

• 申請號: 202010861756.0
• 申請日: 2020-08-25
• 公開（公告）號: CN111961665A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 袁潤余;柯昌文;曾漢日;蘇娟;周平平;武婕;陸靖
• 申請（專利權）人: 廣東省疾病預防控制中心;廣東省公共衛生研究院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/70;C12Q1/6851
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 林青中

本發明涉及微生物檢測技術領域，具體而言，涉及一種引物對探針組合產品、試劑盒及其在檢測腸道病毒中的應用。本發明所提供的引物對探針組合產品可用于檢測多種腸道病毒，具有靈敏度高，特異性強以及精準絕對定量的特點，可用于腸道病毒的快速定量精確檢測。

技術領域

本發明涉及微生物檢測技術領域，具體而言，涉及一種引物對探針組合產品、試劑盒及其在檢測腸道病毒中的應用。

背景技術

腸道病毒(Enterovirus,EV)屬于小RNA病毒科(Rcomaviruses)，是一組無包膜單鏈RNA微小核糖核酸病毒，是人類感染的常見病原體之一。腸道病毒包括脊髓灰質炎病毒、柯薩奇病毒、埃可病毒、新腸道病毒、輪狀病毒等在內的70多個血清型，可致腸道與呼吸道感染、脊髓灰質炎、心肌炎、無菌性腦膜炎和手足口病等多種感染，并且發病又多以綜合征出現，病情輕重懸殊，嬰幼兒患者可暴發嚴重心肌炎或重癥肺炎，尤其新生兒期的暴發流行可致死亡。一種綜合征可由不同病毒所引起，同一種(型)病毒可以導致不同綜合征是腸道病毒屬病毒感染的普遍現象。患者感染腸道病毒后多數為亞臨床表現，不易被發現，因此,有效而及時地做出病原學診斷難度較大。

目前，腸道病毒傳統的實驗室診斷法如病毒培養法、血清學診斷、直接電鏡觀察法。但存在操作復雜、耗時過長、特異性差、靈敏度低等缺點，而且由于腸道病毒血清型較多，傳統的病毒細胞培養法和血清學法均因各自的特點，檢測較為困難，難于滿足臨床需要。截至目前為止，腸道病毒尚無針對性的有效治療方法，其防治工作主要是通過疫苗開展，除脊髓灰質炎和EV71外，尚無疫苗可供預防，是當前嚴重影響人類健康的重要病原之一。因此，建立快速、簡便、特異的病原學診斷方法，顯得尤為重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有靈敏度高、特異性好、精準度高的，可用于多種腸道病毒的快速定量檢測的引物對探針組合產品以及其在檢測腸道病毒中的應用。

本發明涉及一種引物對探針組合產品，包括核苷酸序列分別如SEQ ID NO：1和2所示的上游引物和下游引物；以及

核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的探針。

本發明還是涉及一種試劑盒，所述試劑盒包括如上所述的引物對探針組合產品。

根據本發明的再一方面，本發明還涉及一種檢測腸道病毒的非診斷目的方法，包括使用如上所述的引物對探針組合產品或如上所述的試劑盒對待檢測物進行檢測。

本發明的有益效果為：

本發明所提供的引物對探針組合產品可用于檢測多種腸道病毒，具有靈敏度高，特異性強以及精準絕對定量的特點，可用于腸道病毒的快速定量精確檢測。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發明的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發明一個實施例中EV71陽性樣品在FAM通道中檢測結果；

圖2為本發明一個實施例中CA16陽性樣品在FAM通道中檢測結果；

圖3為本發明一個實施例中CA6陽性樣品在FAM通道中檢測結果；

圖4為本發明一個實施例中CA10陽性樣品在FAM通道中檢測結果；

圖5為本發明一個實施例中CA4陽性樣品在FAM通道中檢測結果；

圖6為本發明一個實施例中陰性對照樣品結果；

圖7為本發明一個實施例中使用其他引物探針設計的對比例的檢測結果。

具體實施方式