[發(fā)明專利]一種昆布中有機(jī)汞的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010857735.1
• 申請(qǐng)日: 2020-08-24
• 公開（公告）號(hào): CN112129862A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹君;宋曉玉;王淑玲;王悅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 杭州杭誠(chéng)專利事務(wù)所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，公開了一種昆布中有機(jī)汞的檢測(cè)方法，包括以下步驟：（1）昆布預(yù)處理：對(duì)昆布進(jìn)行粉碎和消解，獲得樣品溶液；（2）毛細(xì)管柱活化；（3）毛細(xì)管電泳：將3?巰基?1?丙烷磺酸鈉水溶液通過(guò)壓力進(jìn)樣注入毛細(xì)管柱中；將樣品溶液通過(guò)微孔濾膜過(guò)濾后，通過(guò)壓力進(jìn)樣注入毛細(xì)管柱中；將毛細(xì)管柱兩端插入背景緩沖液中，進(jìn)行毛細(xì)管電泳，獲得電泳色譜圖；（4）數(shù)據(jù)分析：測(cè)量電泳色譜圖中各形態(tài)有機(jī)汞的峰面積，根據(jù)各形態(tài)有機(jī)汞的濃度?峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得各形態(tài)有機(jī)汞含量。本發(fā)明將在線絡(luò)合和在線富集應(yīng)用于昆布中有機(jī)汞的毛細(xì)管電泳檢測(cè)中，檢測(cè)靈敏度高，且操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種昆布中有機(jī)汞的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

中藥的發(fā)展已有數(shù)千年的歷史，如今，中藥在國(guó)內(nèi)外的醫(yī)藥研究和生產(chǎn)領(lǐng)域都具有重要且不可替代的作用。隨著國(guó)際醫(yī)藥研究工作者對(duì)中藥的繼續(xù)和深入探索，各國(guó)日益重視中藥安全問(wèn)題，對(duì)于中藥安全的監(jiān)督管理也日益加強(qiáng)。在這種情形下，用于檢測(cè)中藥中各種有害化合物，包括有害金屬離子、添加劑和農(nóng)藥殘留等的痕量檢測(cè)和分析技術(shù)亟待開發(fā)。汞是最具毒性的元素之一，以有機(jī)化合物或無(wú)機(jī)離子的形式廣泛存在于海洋生物和化妝品中。汞物種對(duì)生物體有害，例如引起神經(jīng)系統(tǒng)損害，增加罹患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，從而影響記憶力、識(shí)別障礙。其中，有機(jī)汞物種由于其親脂性和生物蓄積性，比無(wú)機(jī)汞更容易通過(guò)生物膜進(jìn)入人體，并且毒性更高。因此，檢測(cè)中藥材中的汞，尤其是有機(jī)汞，如甲基汞、乙基汞、苯基汞，是十分非常重要的。

由于汞物種難以被紫外檢測(cè)到，在預(yù)處理過(guò)程中必須使用特殊的絡(luò)合試劑，如L-半胱氨酸、18-冠醚-6、咪唑、巰基乙酸等，絡(luò)合汞物種以增加汞的紫外吸收強(qiáng)度。有學(xué)者以L- 半胱氨酸為絡(luò)合試劑，在進(jìn)樣前與汞形成親水性汞-半胱氨酸化合物，以便用于毛細(xì)管電泳分析，該方法成功應(yīng)用于水樣中痕量甲基汞和乙基汞的測(cè)定。也有報(bào)告指出，汞物種與絡(luò)合試劑十二烷基胺相互作用后可被紫外檢測(cè)到，且當(dāng)選擇18-冠醚-6作為絡(luò)合試劑，3-巰基-1-丙烷磺酸作為受體相時(shí)，則能夠?qū)崿F(xiàn)檢測(cè)靈敏度的顯著提高。然而，上述所有方法都是離線絡(luò)合(即在樣品注射到毛細(xì)管柱前進(jìn)行絡(luò)合)，具有操作復(fù)雜、重復(fù)性差的缺點(diǎn)。

目前，有許多分析儀器，例如毛細(xì)管電泳色譜、高效液相色譜和氣相色譜等常被用于分析化學(xué)。其中，毛細(xì)管電泳具有高度自動(dòng)化、分離模式多樣性、微量進(jìn)樣、分離高效的特點(diǎn)，而被廣泛使用。然而，由于毛細(xì)管的光線短和直徑小，導(dǎo)致毛細(xì)管電泳的靈敏度偏低。為了提高毛細(xì)管電泳的靈敏度，需要對(duì)待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行富集。但目前利用毛細(xì)管電泳檢測(cè)汞的現(xiàn)有技術(shù)中，采用的均為離線富集(即在樣品注射到毛細(xì)管柱前對(duì)汞進(jìn)行富集)，操作復(fù)雜，重復(fù)性差。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種昆布中有機(jī)汞的檢測(cè)方法。本發(fā)明將在線絡(luò)合和在線富集應(yīng)用于昆布中有機(jī)汞的毛細(xì)管電泳檢測(cè)中，檢測(cè)靈敏度高，且操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好。

本發(fā)明的具體技術(shù)方案為：

一種昆布中有機(jī)汞的檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)昆布預(yù)處理：對(duì)昆布進(jìn)行粉碎和消解，獲得樣品溶液；

(2)毛細(xì)管柱活化：依次用0.8～1.2M氫氧化鈉溶液、0.08～0.12M氫氧化鈉溶液、超純水、背景緩沖液沖洗毛細(xì)管柱，對(duì)毛細(xì)管柱進(jìn)行活化；

(3)毛細(xì)管電泳：將3-巰基-1-丙烷磺酸鈉水溶液通過(guò)壓力進(jìn)樣注入毛細(xì)管柱中；將樣品溶液通過(guò)微孔濾膜過(guò)濾后，通過(guò)壓力進(jìn)樣注入毛細(xì)管柱中；將毛細(xì)管柱兩端插入背景緩沖液中，進(jìn)行毛細(xì)管電泳，獲得電泳色譜圖；

(4)數(shù)據(jù)分析：測(cè)量電泳色譜圖中各形態(tài)有機(jī)汞的峰面積，根據(jù)各形態(tài)有機(jī)汞的濃度-峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得樣品溶液中各形態(tài)有機(jī)汞的濃度，從而獲得昆布中各形態(tài)有機(jī)汞的含量。