[發(fā)明專利]一種糖化血紅蛋白的時間分辨熒光免疫傳感器在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010853959.5 | 申請日： | 2020-08-24 |
| 公開（公告）號： | CN114088954A | 公開（公告）日： | 2022-02-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 尹永梅;郗日沫;石洋洋 | 申請（專利權(quán)）人： | 南開大學 |
| 主分類號： | G01N33/72 | 分類號： | G01N33/72;G01N33/577 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300071*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 糖化 血紅蛋白 時間 分辨 熒光 免疫 傳感器 | ||
1.一種應用時間分辨免疫法檢測糖化血紅蛋白的傳感器，其特征在于，包括以下步驟：
1)包被：將血紅蛋白單克隆抗體稀釋液加入到黑色酶標孔中，3個復孔，孵育，洗滌3次。
2)封閉：向上述已包被的酶標板中加入封閉液，孵育，洗滌3次。
3)加樣：向上述已封閉完成的酶標孔中加入HbA1c稀釋液，孵育，洗滌3次。
3)加功能化的Eu3+螯合物：向上述酶標孔中加入功能化的Eu3+螯合物，孵育，洗滌3次。
4)加酸性增強液：向上述酶標板中加入酸性增強液，孵育，檢測熒光信號。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的血紅蛋白單克隆抗體的濃度為1μg/mL，加入量為100μL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的血紅蛋白單克隆抗體的孵育條件為37℃，2h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的封閉液的組成為BSA的Tris-HCl緩沖液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的封閉液加入體積為200μL，孵育條件為37℃，2h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的樣品溶液的體積為100μL，孵育條件為37℃，0.5h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的功能化Eu3+螯合物為Eu-DTPA-2APBA，即連有苯硼酸的Eu3+螯合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的功能化Eu3+螯合物溶液的體積為100μL，濃度為10μg/mL，孵育條件為37℃，0.5h。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的酸性增強液包括β-噻吩甲酰三氟丙酮(TTA)、三辛基氧化磷(TOPO)和Triton X-100。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種應用時間分辨免疫傳感器檢測糖化血紅蛋白的方法，其特征在于，所述的酸性增強液的體積為200μL/孔，孵育條件為37℃，15min；熒光強度信號由多功能微孔檢測儀615nm讀出，其激發(fā)波長340nm。
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