[發(fā)明專利]用于西尼羅河病毒檢測的試劑、試劑盒、檢測方法及應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010852040.4 | 申請日： | 2020-08-21 |
| 公開（公告）號： | CN111996291A | 公開（公告）日： | 2020-11-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 吳江;林彥星;黃超華;史衛(wèi)軍;花群義;阮周曦;賈鵬;曹琛福;曾少靈;林永濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 深圳海關(guān)動植物檢驗檢疫技術(shù)中心 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281 | 代理人： | 李小焦;彭家恩 |
| 地址： | 518000 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 尼羅河 病毒 檢測 試劑 試劑盒 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種用于西尼羅河病毒檢測的試劑，其特征在于：所述試劑包括引物對和探針，所述引物對的上游引物為Seq ID No.1所示序列，所述引物對的下游引物為Seq ID No.2所示序列，所述探針為Seq ID No.3所示序列或者Seq ID No.3所示序列的反向互補序列；
Seq ID No.1：5’-CCTGATTGAATTGGAACCACCCTTTGGAGACTCAT-3’
Seq ID No.2：5’-AGTCCCAAGCTGTATCTCCTAGGGCGGCTAATCTC-3’
Seq ID No.3：5’-CATAGTGGTGGGCAGAGGAGAACAACAGATTAATCACCATTGGCACAAGTC-3’
Seq ID No.3所示序列的探針中，第30個堿基修飾熒光基團6-FAM-Dt，第31個堿基替換為堿基類似物dSpacer，第34個堿基修飾熒光淬滅基團BHQ1-dT，3’末端修飾C3 Spacer。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑，其特征在于：所述探針的5’端標(biāo)記有FAM熒光基團，探針的3’端標(biāo)記有BHQ1淬滅基團。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑在制備西尼羅河病毒檢測試劑盒、檢測試紙條或檢測芯片中的應(yīng)用。
4.一種用于西尼羅河病毒檢測的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中含有權(quán)利要求1或2所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中還含有凍干酶粉、再水化緩沖液、醋酸鎂溶液、去離子水。
6.一種非診斷治療目的的檢測西尼羅河病毒的方法，其特征在于：包括采用權(quán)利要求1或2所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑，或者權(quán)利要求4或5所述的用于西尼羅河病毒檢測的試劑盒，對待測樣品進行一步法逆轉(zhuǎn)錄重組酶聚合酶擴增，并采用熒光檢測儀收集熒光。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測西尼羅河病毒的方法，其特征在于：所述一步法逆轉(zhuǎn)錄重組酶聚合酶擴增的反應(yīng)條件為，39℃恒溫反應(yīng)15分鐘。
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