[發(fā)明專利]一種小鼠肺部巨細(xì)胞病毒潛伏再激活感染模型的建立方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010847768.8
• 申請(qǐng)日: 2020-08-13
• 公開（公告）號(hào): CN111955415A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張志輝
• 主分類號(hào): A01K67/02
• 分類號(hào): A01K67/02;A61K31/573
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種小鼠肺部巨細(xì)胞病毒潛伏再激活感染模型的建立方法，其特征在于，先向小鼠腹腔內(nèi)注射MCMV病毒建立小鼠肺部潛伏性感染巨細(xì)胞病毒，再選取潛伏性MCMV感染小鼠，口服藥物強(qiáng)的松誘導(dǎo)肺部潛伏性巨細(xì)胞病毒再活化，鑒定肺部潛伏性巨細(xì)胞病毒的再激活。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，是在MCMV感染小鼠后，培養(yǎng)16周～24周后再口服藥物強(qiáng)的松誘導(dǎo)肺部潛伏性巨細(xì)胞病毒再活化。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述MCMV病毒為MCMV Smith病毒株。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的建立方法，其特征在于，所述腹腔內(nèi)注射MCMV病毒的劑量為5×104PFU。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述小鼠為6至8周齡的雌性BALB/c小鼠。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，潛伏性MCMV感染小鼠是通過轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，體外空斑實(shí)驗(yàn)和聚焦擴(kuò)增測(cè)定方法以確認(rèn)存在MCMV潛伏性感染，當(dāng)肺組織中MCMV RNA和IVPA或FEA均為陰性時(shí)，表明成功構(gòu)建潛伏性MCMV感染小鼠，否則失敗。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述口服藥物強(qiáng)的松為糖皮質(zhì)激素，潛伏性MCMV感染小鼠口服劑量為1mg/kg，每周服用一次。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，鑒定肺部潛伏性巨細(xì)胞病毒的再激活為用PCR和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)立即早期基因、糖蛋白B基因，DNA聚合酶基因和β-actin基因RNA表達(dá)水平，以及CMV DNA表達(dá)水平，當(dāng)立即早期基因、糖蛋白B基因，DNA聚合酶基因和β-actin基因RNA，以及CMV DNA均表達(dá)為陽性時(shí)，表示潛伏狀態(tài)MCMV發(fā)生再激活。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立方法，其特征在于，還包括體外空斑實(shí)驗(yàn)和聚焦擴(kuò)增測(cè)定方法MCMV。