[發(fā)明專利]一種產(chǎn)γ-聚谷氨酸的貝萊斯芽孢桿菌及其固體發(fā)酵生產(chǎn)γ-聚谷氨酸的方法

在審

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• 申請日: 2020-08-19
• 公開（公告）號: CN114075520A
• 公開（公告）日: 2022-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 閆巧娟;劉宏;江正強;駱珅;楊紹青
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/02;C12R1/07
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

1.貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263，其在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏編號為CGMCC No.20318。

2.一種菌劑，其活性成分為權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263。

3.權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263或權(quán)利要求2所述的菌劑在生產(chǎn)γ-聚谷氨酸中的應(yīng)用。

4.一種生產(chǎn)γ-聚谷氨酸的方法，包括如下步驟：對權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263進行固體發(fā)酵培養(yǎng)，從發(fā)酵產(chǎn)物中獲得γ-聚谷氨酸。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：對所述貝萊斯芽孢桿菌(Bacillusvelezensis)CAU263進行所述固體發(fā)酵培養(yǎng)時，采用的固體發(fā)酵培養(yǎng)基由固體基質(zhì)和外源添加物組成，所述固體基質(zhì)為工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物，所述外源添加物由碳源、谷氨酸鈉、K₂HPO₄和水組成。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：在所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，所述工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物、所述碳源、谷氨酸鈉、K₂HPO₄和水的配比為1kg：50～200g：50～200g：0.01～0.5g：2～4L。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物為瓜爾豆粕、黃豆粕、棉籽粕、小麥麩皮、面包渣、啤酒糟、豆餅粉、芝麻餅粉中的任意一種或幾種的混合物；和/或

所述碳源為葡萄糖、甘油、蔗糖、可溶性淀粉中的任意一種或幾種的混合物；和/或

組成所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的所述工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物需要經(jīng)過包括如下步驟的預(yù)處理：粉碎過20目篩后，按1g所述工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物：0.5～2mL水的比例加入水浸潤12～24h。

8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一所述的方法，其特征在于：對所述貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263進行所述固體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)溫度為30～37℃恒溫，和/或培養(yǎng)濕度保持在50～70％，和/或培養(yǎng)時間48～96h，和/或每隔12～24h翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)物一次。

9.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一所述的方法，其特征在于：從所述發(fā)酵產(chǎn)物中獲得所述γ-聚谷氨酸是按照包括如下步驟的方法進行的：將所述發(fā)酵產(chǎn)物60℃以下低溫烘干至恒重，粉碎后過20目篩，取3～5g粉末，加水提取1～2h，所述粉末和水的比例為1g所述粉末加入10mL水，離心，上清液中加入1～4倍體積甲醇，靜置12～24h，離心，收集沉淀，用1～4倍體積甲醇洗滌，真空冷凍干燥，即得γ-聚谷氨酸。

10.根據(jù)權(quán)利要求5-9中任一所述的應(yīng)用或方法，其特征在于：所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基由瓜爾豆粕、蔗糖、谷氨酸鈉、K₂HPO₄和水組成；在所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，瓜爾豆粕、蔗糖、谷氨酸鈉、K₂HPO₄和水的配比為1kg：100g：150g：0.05g：3L；

和/或

對所述貝萊斯芽孢桿菌(Bacillus velezensis)CAU263進行所述固體發(fā)酵培養(yǎng)時，培養(yǎng)溫度為37℃恒溫，和/或培養(yǎng)濕度保持在70％，和/或培養(yǎng)時間48h，和/或每隔12h翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)物一次；和/或

所述γ-聚谷氨酸的分子量為1000kDa以上；

進一步地，所述γ-聚谷氨酸的分子量為4020kDa。