[發明專利]一種NT-proBNP檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202010835910.7
• 申請日: 2020-08-19
• 公開（公告）號: CN111781385B
• 公開（公告）日: 2023-07-18
• 發明（設計）人: 李蘭芝;來祥兵;趙愿安;舒芹
• 申請（專利權）人: 武漢生之源生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/535
• 代理公司: 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570
• 代理人: 江慧

1.一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括磁微粒偶聯的NT-proBNP單克隆抗體和堿性磷酸酶標記的NT-proBNP單克隆抗體；

所述磁微粒偶聯的NT-proBNP單克隆抗體中NT-proBNP單克隆抗體結合處于42～46位氨基酸的NT-proBNP表位；

所述堿性磷酸酶標記的NT-proBNP單克隆抗體包括均采用堿性磷酸酶標記的第一NT-proBNP單克隆抗體和第二NT-proBNP單克隆抗體，所述第一NT-proBNP單克隆抗體結合處于13～24位氨基酸的NT-proBNP表位，所述第二NT-proBNP單克隆抗體結合處于63～71位氨基酸的NT-proBNP表位；所述磁微粒偶聯的NT-proBNP單克隆抗體、堿性磷酸酶標記的第一NT-proBNP單克隆抗體、堿性磷酸酶標記的第二NT-proBNP單克隆抗體分別與待測樣本中NT-proBNP抗原的3個表位結合，形成“夾心”復合物，所述磁微粒的濃度為2～8mg/mL，所述NT-proBNP單克隆抗體濃度為20～500?ug/mL，所述第一NT-proBNP單克隆抗體和所述第二NT-proBNP單克隆抗體的濃度均為600～1200?ug/mL。

2.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述磁微粒表面的活性基團為-COOH或-NH₂，所述磁微粒的大小為0.8μm～3μm。

3.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括所述磁微粒偶聯的NT-proBNP單克隆抗體的稀釋液，配方為：0.1%BSA、0.05%Proclin300、0.02%吐溫20、0.02M?pH7.4的PB緩沖液。

4.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括所述堿性磷酸酶標記的NT-proBNP單克隆抗體的稀釋液，配方為：0.9%氯化鈉，1mM六水合氯化鎂，0.1mM無水氯化鋅，0.1%牛血清白蛋白、0.05%Proclin300，0.02M?pH7.4?的Tris-HCl緩沖液。

5.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括校準品，所述校準品是用校準品稀釋液配制的NT-proBNP重組蛋白，所述校準品稀釋液配方為：0.9%氯化鈉、0.1%牛血清白蛋白、3%海藻糖、0.05%Proclin300、0.02M?pH7.4?的PB緩沖液。

6.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括發光底物，所述發光底物主要成分為：3-(2-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧環乙烷二鈉鹽，簡稱AMPPD。

7.根據權利要求1所述的一種NT-proBNP檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括清洗液，所述清洗液配方為：0.9%氯化鈉、0.01%吐溫20、0.05%Proclin300、0.02M?pH7.4?的Tris-HCl緩沖液。