[發明專利]一種滸苔中活性成分的制備方法

有效

• 申請號: 202010832170.1
• 申請日: 2020-08-18
• 公開（公告）號: CN111848360B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 楊文鴿;王宸;張進杰;李超;徐大倫
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07C37/82
• 分類號: C07C37/82;C07C39/08;C07C51/47;C07C65/03;C07D311/62;C07D473/12
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王磊

本發明公開了一種滸苔中活性成分的制備方法，對條滸苔的醇提物進行乙酸乙酯萃取獲得條滸苔提取物，對條滸苔提取物高速逆流色譜進行分離純化，采用高速逆流色譜進行分離純化的步驟為，先采用在線收集模式獲得按先后順序獲得組分I、組分II、組分III、組分IV、組分V、組分VI，再采用循環逆流色譜模式對組分I分離至少6次獲得化合物3，采用循環逆流色譜模式對組分I分離至少5次，按照先后順序依次獲得化合物4、化合物1和化合物2。本發明提供的方法能夠從滸苔中分離制備出多酚類化合物。

技術領域

本發明涉及滸苔有效成分的高效制備方法，具體涉及一種滸苔中活性成分的制備方法。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

滸苔屬(Enteromorpha)，隸屬綠藻門(Chlorophyta)、綠藻綱(Chlorophyceae)、石莼目(Ulvales)、石莼科(Ulvaceae)，藻體鮮綠色，細胞壁為單層細胞，圍成中空管，細胞單核，片狀葉綠體；廣泛分布在海洋水體中，資源豐富，富含多糖、蛋白質、維生素、微量元素等，可用于食用、藥用和飼料等。近年來，我國黃海海域連續多年發生綠潮災害。自2007年來，以滸苔為主的綠潮暴發性的增殖、聚集、形成大規模災害。造成海洋水體缺氧、魚蝦死亡，給生態環境帶來直接和間接的經濟損失。可為滸苔的經濟價值和營養價值作進一步地探索。滸苔中活性成分的分離技術并不完善，傳統技術具有效率低、耗時長、成本高的缺點。現如今，急需一種高效的技術應用于分離。

高速逆流色譜(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)是20世紀80年代發展起來的一種連續高效的液-液分配色譜分離技術，它不用任何固態的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種特殊的單向性流體動力學平衡，當其中一相作為固定相，另一相作為流動相，在連續洗脫的過程中能保留大量固定相。它相對于傳統的固-液柱色譜技術，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優點。目前HSCCC技術正在發展成為一種備受關注的新型分離純化技術，已經廣泛應用于生物醫藥、天然產物、食品和化妝品等領域，特別在天然產物行業中已被認為是一種有效的新型分離技術，適合于中小分子類物質的分離純化。因此，滸苔中活性成分的分離結合高速逆流色譜技術具有廣闊的發展前景。

然而經過發明人研究發現，滸苔中含有多種多酚類活性成分，采用高速逆流色譜不僅難以對多酚類活性成分進行檢測，而且難以對其中的多酚類活性成分進行分離制備。

發明內容

為了解決現有技術的不足，本發明的目的是提供一種滸苔中活性成分的制備方法，該方法能夠從滸苔中分離制備出多酚類化合物。

為了實現上述目的，本發明的技術方案為：

一種滸苔中活性成分的制備方法，對條滸苔的醇提物進行乙酸乙酯萃取獲得條滸苔提取物，對條滸苔提取物高速逆流色譜進行分離純化，采用高速逆流色譜進行分離純化的步驟為，先采用在線收集模式獲得按先后順序獲得組分I、組分II、組分III、組分IV、組分V、組分VI，再采用循環逆流色譜模式對組分I分離至少6次獲得化合物3，采用循環逆流色譜模式對組分III分離至少5次，按照先后順序依次獲得化合物4、化合物1和化合物2；組分II為化合物4，組分IV為化合物5，組分V為化合物6，組分VI為化合物7；

其中，高速逆流色譜的溶劑體系為由正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按組成，正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水體積比為1:8.5～9.5:0.9～1.1:8.5～9.5；

化合物1為對苯二酚，化合物2為沒食子酸，化合物3為沒食子兒茶素，化合物4為咖啡因，化合物5為(-)-表兒茶素，化合物6為(-)-表兒茶素沒食子酸酯，化合物7為表兒茶素沒食子酸酯。