[發(fā)明專利]一種復合微球的制備方法及其應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010831794.1
• 申請日: 2020-08-18
• 公開（公告）號: CN111925556A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫振華;黃珂;李英文;施坤寧;楊慧瑩;蔣雪峰
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇普瑞康生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C08J9/36
• 分類號: C08J9/36;C08J9/28;C08J9/26;C08L67/04;C08L89/00;C12N5/00
• 代理公司: 北京林達劉知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

1.一種聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球，其特征在于，包括：

1)聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球，

2)明膠；

其中所述聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球的表面與所述明膠共價鍵結(jié)合；所述明膠的質(zhì)量為復合微球的總質(zhì)量的0.00001～10％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球，其特征在于，所述聚乳酸-羥基乙酸中的乳酸單元和羥基乙酸單元的摩爾比例為90:10～50:50。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球，其特征在于，聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球為直徑為100～500μm的球狀顆粒。

4.一種制備聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球的方法，其特征在于，包括：

1)將聚乳酸-羥基乙酸溶解于有機溶劑中，向其加入致孔劑并以動態(tài)方式形成乳液一或溶液一，后將所述乳液一或溶液一在液面以下加入到聚乙烯醇水溶液中并在攪拌下形成乳液二，待去除所述致孔劑和所述有機溶劑后，進而收集、洗滌，得到聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球；

2)在所述聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球的表面上進行活化反應(yīng)，形成可與明膠反應(yīng)的活性基團，得到活化的聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球；

3)將所述活化的聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球與明膠水溶液混合并反應(yīng)，經(jīng)收集，洗滌和干燥獲得所述聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球，

其中所述聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球的直徑為100～500μm，其表面與所述明膠共價鍵結(jié)合，所述明膠的質(zhì)量為復合微球的總質(zhì)量的0.00001～10％。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述有機溶劑為選自二氯甲烷、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、正已烷、已烷、石油醚、苯、甲苯、四氫呋喃、二甲亞砜、苯甲醇中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，聚乳酸-羥基乙酸在所述有機溶劑中質(zhì)量濃度為1～40％；所述聚乙烯醇水溶液中的聚乙烯醇的質(zhì)量濃度為0.1～5％。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述致孔劑選自碳酸氫鈉水溶液、碳酸氫銨水溶液、磷酸鹽緩沖溶液、氯化鈉水溶液、二次水、明膠水溶液、聚乙烯醇水溶液、泊洛沙姆水溶液、甲醇、乙醇、2-甲基戊烷、蔗糖水溶液中的至少一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述動態(tài)方式為均質(zhì)、渦旋或超聲。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟1)中，所述乳液一或溶液一在液面以下通過注射形式加入到聚乙烯醇水溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述活化反應(yīng)包括：

將所述聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球浸泡在N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺(EDC)溶液中進行活化，洗滌收集得到所述活化的聚乳酸-羥基乙酸基礎(chǔ)微球。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述NHS和所述EDC的摩爾比(NHS:EDC)為1:10～10:1。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述活化的時間為1～120min。

13.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟3)所述明膠水溶液中的明膠的濃度為0.1～20％，pH值為7.5～10。

14.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟3)所述反應(yīng)在攪拌下進行，反應(yīng)時間為1～24h，反應(yīng)溫度為20～50℃。

15.一種培養(yǎng)細胞的方法，其特征在于，該方法以根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚乳酸-羥基乙酸/明膠復合微球為微載體培養(yǎng)細胞。