[發明專利]一種新型冠狀病毒N蛋白抗原變體及其在新型冠狀病毒抗體檢測中的應用

在審

• 申請號: 202010831509.6
• 申請日: 2020-08-18
• 公開（公告）號: CN112028977A
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: 崔大祥;田靜;王侃;劉巖磊;梁輝;李雪玲
• 申請（專利權）人: 上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/532;G01N33/531
• 代理公司: 上海東亞專利商標代理有限公司 31208
• 代理人: 董梅

1.一種多肽，其特征在于，所述的多肽是冠狀病毒N蛋白表位肽，具有冠狀病毒N蛋白表位肽活性并且在C端添加半胱氨酸殘基；

突變發生的氨基酸殘基位點選自：

第342的賴氨酸、第347的賴氨酸、第387的賴氨酸、第388的賴氨酸突變為同源性較低的氨基酸；

所述的冠狀病毒N蛋白編碼第340-419的多肽序列為SEQ ID NO 7。

2.根據權利要求1所述的多肽，其特征在于，所述的突變發生的氨基酸殘基突變為丙氨酸。

3.根據權利要求1所述的多肽，其特征在于，所述的多肽的序列為SEQ ID NO 2-SEQ IDNO 6中任意一條所示。

4.根據權利要求1所述的多肽的應用，其特征在于，所述的多肽作為檢測冠狀病毒N蛋白的標志物，用于捕獲或者篩選識別冠狀病毒N蛋白的抗體。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

制備權利要求1-3中任意一種多肽；和/或

將權利要求1-3中任意一種多肽與載體蛋白或者大分子聚合物偶聯；

檢測識別冠狀病毒N蛋白的抗體的存在。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的載體蛋白選自BSA、HSA、KLH、OVA；

所述的大分子聚合物是羧甲基纖維素。

7.一種篩選冠狀病毒N蛋白抗體的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）化學合成權利要求1-3中任意一種多肽或者其變體，或將編碼權利要求1-3中任意一種多肽或者其變體的核酸連接到表達載體，導入包括酵母菌或大腸桿菌的宿主細胞內，表達所述多肽；

（2）步驟（1）獲得的多肽與載體蛋白或者大分子偶聯；

（3）偶聯多肽固定于固相載體或與膠體金偶聯成為金標抗原，用于識別或者篩選冠狀病毒N蛋白的抗體。

8.一種抗原組合物，其特征在于，含有：

權利要求1-3任意一項所述的多肽或者其變體衍生物；和

檢測上可接受的稀釋劑、載體或助劑。

9.一種檢測試劑，其特征在于，包括權利要求1-3中任意一種多肽、或者權利要求8所述的抗原組合物；

所述的檢測是側向層析或ELISA。

10.一種試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括檢測試紙；

所述的檢測試紙含有權利要求1-3中任意一條所述的多肽。