[發(fā)明專利]川芎均一性多糖及其提取方法與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010829599.5
• 申請日: 2020-08-17
• 公開（公告）號: CN111777693A
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鮑依稀;鐘誠;劉子靖;張旭裕;蒲有為
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00;A61P37/02;A61P1/16
• 代理公司: 重慶市嘉允啟行專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50243
• 代理人: 胡柯

本發(fā)明提供一種川芎多糖及其提取方法與應(yīng)用，具體步驟如下：以川芎為原材料，經(jīng)過熱水提取步驟、乙醇沉淀步驟、去除蛋白步驟、透析濃縮冷凍干燥步驟，制得川芎粗多糖；對川芎粗多糖，采用DEAE Sepharose^TMFast Flow柱層析技術(shù)提取川芎多糖；對川芎多糖，采用Sephacryl^TMS?300High Resolution柱層析技術(shù)提取川芎得到兩種均一性多糖LCXP?1a、LCXP?3a，對比兩種川芎均一性多糖在肝癌免疫調(diào)節(jié)的實驗表明川芎均一性多糖具有免疫調(diào)節(jié)抗腫瘤作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物提取技術(shù)領(lǐng)域，特別是川芎均一性多糖及其提取方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

川芎是一種歷史悠久的傳統(tǒng)中藥，近年來，川芎的多種生物學(xué)活性被廣泛研究，主要包括抗炎、心血管效應(yīng)、減緩細胞衰老、抗氧化和體外抗腫瘤活性。目前已從川芎中分離出170多種成分，包括鄰苯二甲酸酯、萜烯類及其烯醇、生物堿、多糖、有機酸及其酯類等。川芎多糖(Ligusticum chuanxiong polysaccharides,LCXP)是川芎的主要生物學(xué)活性物質(zhì)之一，LCXP的研究逐漸增多，通常包括LCXP的提取分離純化和生物活性的研究。研究表明許多免疫類多糖可以通過激活免疫細胞，特別是抗原呈遞細胞來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用?？乖蔬f細胞表面有大量的Toll樣受體(TLR)，可以識別抗原并激活細胞內(nèi)信號通路，在先天和適應(yīng)性免疫反應(yīng)中至關(guān)重要，參與了一些中藥多糖的抗腫瘤活性。

傳統(tǒng)的多糖的分離提取方法包括水提醇沉法以及酶提取法、超聲波輔助提取法、超臨界流體萃取法、超高壓提取技術(shù)微波輔助提取法和雙水相萃取等新技術(shù),對其分離原理、處理方式和效果都不相同。

公開號為CN105273094，名為“一種川芎多糖快速分離的方法”的發(fā)明專利中通過將川芎根干燥粉碎脫脂后，用乙醇-無機鹽雙水相提取液混合，微波萃取，離心，分離醇，沉淀，干燥得粗多糖；在[期刊論文]帕熱哈提·艾合買提,賽德艾合買提,許珊珊,吉爾格麗,吳強,Pare Hati·Aihemaiti,Saide Aihemaiti,Xu Shanshan,Ji'er Gel i,Wu Qiang-《科學(xué)之友》2011年18期川芎多糖分離提取的工藝探究中，通過將川芎根經(jīng)石油醚脫脂，熱水提取，乙醇沉淀，去除蛋白，無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，冷凍干燥得川芎多糖。它們的不足在于沒有用柱層析方法進一步的分離純化，提取的川芎多糖不是均一性多糖，純度低，未能檢測出其分子量和單糖組成、沒有對生物活性進行探索。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的是提供一種川芎均一性多糖提取方法。

本發(fā)明的第二目的是提供兩種川芎均一性多糖。

本發(fā)明的第三目的是提供兩種川芎均一性多糖在肝癌免疫調(diào)節(jié)抗腫瘤方面的應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種川芎均一性多糖的提取方法，具體步驟如下：

1)以川芎為原材料，粗提取川芎粗多糖；

2)對川芎粗多糖提取物，采用DEAE Sepharose^TM Fast Flow柱層析技術(shù)提取得到川芎多糖LCXP-1、LCXP-3；

3)對川芎多糖LCXP-1、LCXP-3，采用Sephacryl^TMS-300High Resolut ion柱層析技術(shù)提取得到川芎均一性多糖LCXP-1a、LCXP-3a。

進一步，步驟1)中所述粗提取川芎粗多糖的具體方法如下：