[發明專利]預測抗結核藥物所致的肝損傷基因檢測的試劑、試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202010814523.5
• 申請日: 2020-08-13
• 公開（公告）號: CN111979310A
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 吳濤;應斌武;趙珍珍
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 成都科海專利事務有限責任公司 51202
• 代理人: 李俊

本發明提供了一種預測抗結核藥物所致的肝損傷基因檢測的試劑、試劑盒及檢測方法，涉及結核病治療技術領域，該試劑用于預測結核病患者接受抗結核藥物治療產生肝不良反應的風險，試劑包括用于檢測LEPR基因在如下SNPs位點中的任意一種位點的基因型：rs2025804和rs2104564。本發明發現通過其LEPR基因的多態性的檢測，可以預測結核病患者接受抗結核藥物治療后產生不良反應的風險，為避免相關抗結核藥物導致不良反應提供一定的支持，也為結核病患者的用藥提供一定的指導。

技術領域

本發明涉及結核病技術領域，尤其是涉及一種預測抗結核藥物所致的肝損傷基因檢測的試劑、試劑盒及檢測方法。

背景技術

結核病(Tuberculosis，TB)是嚴重危害人類健康的重大傳染病。根據世界衛生組織(WHO)全球結核病年報報道，2017年全球約1000萬人新發感染結核病，我國約有88.9萬人新發感染結核病，是全球第二大結核病高負擔國家。結核病占我國2017年法定傳染病發病數第二位，死亡率第二位，抗結核治療形勢仍然十分嚴峻。結核病治療的基石是WHO推薦的標準化抗結核治療方案：利福平(rifampicin，R)、異煙肼(isoniazid，H)、乙胺丁醇(ethambutol，E)和吡嗪酰胺(pyrazinamide，Z)持續聯合服用2個月，再聯合服用異煙肼和利福平4個月(2HRZE/4HR)。標準治療方案對繁殖期和靜止期的結核分枝桿菌均有較強的殺菌抑菌功能，長期聯合用藥對治療結核病有協同作用并可減少耐藥性產生，但不可避免增加患者的藥物不良反應(Adverse drug reactions，ADR)，它成為醫生在抗結核治療中面臨的重大挑戰。

藥物不良反應(ADR)是臨床醫療面臨的重要問題，ADR是美國臨床治療病人的第四大死因，每年死亡人數超過10萬人，約占醫院入院人數的7％。2017年中國藥品不良反應監測網絡收到ADR報告超過140萬份，新發生的和嚴重藥品不良反應占總報告的30.3％，其中抗結核藥不良反應事件占抗感染類藥物的第四位。抗結核治療過程中常見的ADR包括高尿酸血癥、肝毒性、腎毒性、過敏反應、外周神經炎、胃腸道反應、血液系統損害等。其中，以抗結核藥物所致的肝損傷(Antituberculosis drug-induced liver injury，AT-DILI)為最常見的嚴重不良事件之一，其臨床表現多樣，從亞臨床肝損傷引起的患者血清生化改變，到急性肝細胞性損傷引起的急性肝炎、膽汁淤積性黃疸、結節性增生、竇狀阻塞綜合征、脂肪性肝炎，甚至肝衰竭。國外報道不同地區的AT-DILI發生率為2-28％，國內報道的發生率為11.9％-15.94％，AT-DILI導致的肝衰竭率和死亡率可分別高達15％和67％。不同抗結核藥物的肝損傷機制各異，肝損傷反應程度不同，前期研究報道異煙肼、利福平和吡嗪酰胺的肝損傷發生率分別為4％、2％和50％，聯合用藥可導致肝損傷發生率增加。結核病人出現肝損傷降低抗結核治療的有效性、延長病程、增加患者經濟負擔，導致治療失敗、復發和耐藥的產生，重者甚至增加患者的死亡率。臨床AT-DILI形勢十分嚴峻，目前缺乏有效的AT-DILI早期預測標志物，不能滿足篩查高危患者，以達到預防AT-DILI的臨床需求。因此，迫切需要尋找準確特異的分子標志物以及有效的預測方法，從而使結核病人群安全地從有效治療中獲益。

個體不同遺傳背景是導致藥物不良反應個體化差異的關鍵因素，而其中單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)標志物是目前藥物基因組學中最主要的分子標志物之一。SNPs僅發生單個核苷酸的變化，其發揮功能的方式有很多種，如位于編碼區的SNPs可以通過堿基序列的改變導致蛋白質序列發生改變從而影響蛋白質的功能，或者通過改變核糖體通過mRNA特定區域的速度，進而影響翻譯動力學，最終導致蛋白質結構和功能的改變；位于基因內含子的SNPs可以通過影響剪接位點活性發揮功能；而基因調控區的SNPs通常通過影響啟動子或其他轉錄因子(TF)來調節基因的功能。