[發明專利]一種桑黃指紋圖譜的構建方法、指紋圖譜及應用

有效

• 申請號: 202010805630.1
• 申請日: 2020-08-12
• 公開（公告）號: CN111948326B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 陳萬超;楊焱;張俊峰;張忠;吳迪;李文;李正鵬;張赫男;張勁松;馮娜;陸本坤;王琨
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院;金寨尚臻生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;G01N30/88
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 瞿曉晶

本發明涉及一種桑黃指紋圖譜的構建方法、指紋圖譜及應用，屬于食藥用菌指紋圖譜構建和譜效研究技術領域。本發明提供了一種桑黃指紋圖譜的構建方法，包括以下步驟：取桑黃醇提物制成檢測樣品，進行高效液相色譜分析，流動相A為0.01％乙酸?水溶液；流動相B為乙腈，檢測波長為254nm；根據高效液相色譜分析結果，構建指紋圖譜。本發明所述構建方法能夠實現不同品種桑黃的高效篩選，更具體地，本發明所述構建方法得到的指紋圖譜能夠實現楊樹桑黃(Sanghuangporous?vaninii)的高效篩選。

技術領域

本發明涉及食藥用菌指紋圖譜構建和譜效研究技術領域，具體涉及一種桑黃指紋圖譜的構建方法、指紋圖譜及應用。

背景技術

桑黃屬于真菌界Fungi、擔子菌門Basidiomycota、銹革孔菌目Hymenochaetales、銹革孔菌科Hymenochaetaceae，主要包括來自Phellinus、Inonotus、Fomitiporia和Sanghuangporous等屬，是一類珍貴的藥用真菌，被人們稱為“森林黃金”，它主要生長在桑樹、楊樹和柳樹等闊葉樹木上，它多數呈黃色，也有極少數呈褐色或者黑色，但剖開里面都呈黃色。生長分布集中在東亞地區、中非洲以及北美洲等地區。桑黃在我國很多古書藥籍中都有所記載，傳統中醫中，其主要治療女子崩中帶下、月閉血凝、產后血凝，男子痃癖、兼廖療伏血、下赤血。近年來，隨著現代藥理學、醫學等技術的快速發展，研究發現桑黃具有許多生物活性作用，如增強人體免疫力、保護肝臟、抗腫瘤、抗炎、抗氧化作用、降血糖等，而這些生物活性與其在生長過程中產生的代謝活性物質息息相關，也因此吸引了國內外諸多學者，針對活性成分的提取、純化和活性展開了大量研究工作。

桑黃因寄生樹種、栽培方式和栽培條件不同，導致桑黃品種較多、形態多樣，現對于桑黃品種的判斷，依舊采用表觀形態，或者通過個人經驗結合簡單化學法測定某些化學指標(如黃酮、三萜等)加以判定，結果通常主觀影響因素較大，且不確定性突出，難免造成誤判；也可以采用生物學分析手段進行判斷，但是耗時較長，且成本較高，專業性強。目前并沒有一種能夠桑黃品種的高效篩選的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種桑黃指紋圖譜的構建方法、指紋圖譜及應用。本發明所述構建方法能夠實現不同品種桑黃的高效篩選，更具體地，本發明所述構建方法得到的指紋圖譜能夠實現楊樹桑黃(Sanghuangporous?vaninii)的高效篩選。

本發明提供了一種桑黃指紋圖譜的構建方法，包括以下步驟：

取桑黃醇提物制成檢測樣品，進行高效液相色譜分析，流動相A為體積百分含量為0.01％的乙酸-水溶液；流動相B為乙腈，檢測波長為254nm，梯度洗脫程序為：

從0～5min，流動相A的體積百分含量為75％～75％；流動相B的體積百分含量為25％～25％；

從5～25min，流動相A的體積百分含量為75％～70％；流動相B的體積百分含量為25％～30％；

從25～60min，流動相A的體積百分含量為70％～60％；流動相B的體積百分含量為30％～40％；

從60～70min，流動相A的體積百分含量為60％～5％；流動相B的體積百分含量為40％～95％；

從70～80min，流動相A的體積百分含量為5％～5％；流動相B的體積百分含量為95％～95％；

從80～90min，流動相A的體積百分含量為5％～75％；流動相B的體積百分含量為95％～25％；

從90～100min，流動相A的體積百分含量為75％～75％；流動相B的體積百分含量為25％～25％；

根據高效液相色譜分析結果，構建指紋圖譜。

優選的是，所述桑黃醇提物的制備方法包括以下步驟：