[發明專利]一種干細胞凍存液有效
| 申請號： | 202010797418.5 | 申請日： | 2020-08-10 |
| 公開（公告）號： | CN111727962B | 公開（公告）日： | 2020-12-01 |
| 發明（設計）人： | 寇曉星;施松濤 | 申請（專利權）人： | 醫微細胞生物技術（廣州）有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京市萬慧達律師事務所 11111 | 代理人： | 謝敏楠 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州市南*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 干細胞 凍存液 | ||
1.一種干細胞凍存液，其特征在于，所述干細胞凍存液包含基礎凍存液，并添加有異硫氰酸苯乙酯，所述異硫氰酸苯乙酯在所述干細胞凍存液中的濃度為1-10 μM，所述基礎凍存液包含5v/v％~10v/v％的DMSO和90 v/v％-95v/v% 的FBS；所述干細胞為牙髓干細胞。
2.如權利要求1所述的干細胞凍存液，其特征在于，所述DMSO的濃度為10 v/v％，所述的FBS的濃度為90 v/v％。
3.如權利要求1所述的干細胞凍存液，其特征在于，所述異硫氰酸苯乙酯的濃度為10 μM。
4.一種干細胞的凍存方法，用權利要求1-3任一所述的干細胞凍存液凍存牙髓干細胞。
5.如權利要求4所述的干細胞的凍存方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）將牙髓干細胞與權利要求1-3任一所述的干細胞凍存液混合；和
（2）進行程序降溫至-80℃，然后轉移至液氮中冷凍保存。
6.如權利要求4所述的干細胞的凍存方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
（1）凍存液的制備：制備權利要求1-3任一所述的干細胞凍存液；
（2）細胞懸液的制備：將牙髓干細胞離心洗滌，收集到的牙髓干細胞與所述凍存液混合得到細胞懸液，置于無菌的凍存管中；
（3）冷凍：將所述凍存管進行程序降溫至-75℃～-85℃，然后轉移至液氮中冷凍保存；
（4）細胞復蘇：取出凍存管快速置于37-40℃水浴1-3分鐘，振蕩直至細胞懸液完全融化，離心，以PBS洗滌去除凍存液，即得復蘇的細胞。
7.權利要求1-3任一所述的干細胞凍存液在牙髓干細胞凍存復蘇中的應用。
8.一種干細胞的凍存試劑盒，其特征在于，包含權利要求1-3任一所述的干細胞凍存液，所述干細胞為牙髓干細胞。
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