[發明專利]一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法

有效

• 申請號: 202010796857.4
• 申請日: 2020-08-10
• 公開（公告）號: CN111896658B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 余永秀;李鳳;龍明菊
• 申請（專利權）人: 揚子江藥業集團四川海蓉藥業有限公司;四川海匯藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法,其特征在于,包括如下步驟：

（1）配制混合對照品溶液：取非那雄胺及雜質對照品，用稀釋劑配制成包含非那雄胺及雜質的混合對照品溶液；所述雜質包括17α非那雄胺異構體、5β非那雄胺異構體和5β雜質A異構體；所述稀釋劑為甲醇-水混合溶液；

（2）配制供試品溶液：取供試品，用稀釋劑配制成供試品溶液；

（3）分別通過高效液相色譜法對混合對照品溶液和供試品溶液進行測試，通過比較混合對照品溶液和供試品溶液的色譜圖判斷供試品中是否存在雜質；

所述高效液相色譜的色譜條件為：流動相包括流動相A及流動相B，所述流動相A為磷酸鹽緩沖液，所述流動相B為甲醇；色譜柱的填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠填料；

所述步驟（3）中，高效液相色譜法中，流動相洗脫比例為磷酸鹽緩沖液與甲醇體積比為44:56-46:54。

2.按照權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，通過混合對照品溶液和供試品溶液的色譜圖中各雜質峰的峰面積計算供試品溶液中各雜質的含量。

3.按照權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，高效液相色譜法的色譜條件為：色譜柱為C18柱，柱溫29-31℃，流速為0.55-0.65ml/min，檢測波長為208-212nm，流動相pH值為2.8-3.2，進樣量為30-50μl。

4.按照權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，高效液相色譜法的色譜條件為：色譜柱為Agilent InfinityLabPoroshell 120 EC-C18，柱溫30℃，流速為0.6ml/min，檢測波長為210nm，流動相pH值為3.0，進樣量為40μl。

5.按照權利要求1所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述步驟（3）中，磷酸鹽緩沖液的配制方法為，將磷酸二氫鉀配制成0.01mol/L的溶液，然后用磷酸調節pH值至3.0。

6.按照權利要求1所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述步驟（1）中，混合對照品溶液中各組分的濃度為：非那雄胺0.8-1.5mg/ml，17α非那雄胺異構體、5β非那雄胺異構體和/或5β雜質A異構體各0.8-1.5μg/ml。

7.按照權利要求1所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述雜質還包括已知雜質，所述已知雜質包括雜質A、雜質B和雜質C；

所述雜質A如結構式Ⅰ所示：

式Ⅰ

所述雜質B如結構式Ⅱ所示：

式Ⅱ

所述雜質C如結構式Ⅲ所示：

式Ⅲ。

8.按照權利要求7所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述步驟（1）中，混合對照品溶液中已知雜質的濃度為：雜質A、雜質B和雜質C各2-4μg/ml。

9.按照權利要求1所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，稀釋劑由甲醇與水按體積比60:40混合而成。

10.按照權利要求1所述的一種利用高效液相色譜儀檢測非那雄胺中異構體雜質的方法，其特征在于：所述步驟（3）中對混合對照品溶液和供試品溶液進行測試前，先用系統適用性溶液進行預檢測，以確定合格的色譜條件，所述系統適用性溶液由非那雄胺及各雜質對照品配制而成，所述合格的色譜條件滿足：雜質與雜質之間分離度大于1.5，以及雜質與主成分之間分離度大于1.5；且連續測定5次混合對照品溶液，各異構體雜質峰峰面積RSD值≤2.0%。