[發(fā)明專利]一種利用固體培養(yǎng)基獲得高產(chǎn)蟲草素的方法

在審

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• 申請日: 2020-08-10
• 公開（公告）號: CN111826410A
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉曉紅
• 申請（專利權(quán)）人: 遼東學(xué)院
• 主分類號: C12P19/40
• 分類號: C12P19/40;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 西安銘澤知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

1.一種利用固體培養(yǎng)基獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1，制備固體培養(yǎng)基和蠶蛹液，滅菌；

所述固體培養(yǎng)基配方為：KH₂PO₄ 1-5g，MgSO₄1-3g,維生素B1 2-7g,維生素B2 1-5g，葡萄糖2-3g，蛋白胨2-4g，蠶蛹粉4-6g，大米4-12g，玉米渣2-4g，蕎麥粉2-6g，椰子殼顆粒2-5g，蒸餾水100-300ml，pH調(diào)至6.2-8.3；

所述蠶蛹液由蠶蛹粉、甘氨酸、腺嘌呤和蒸餾水混合而成；

將上述固體培養(yǎng)基分裝后與蠶蛹液置于121℃下滅菌20-30min；

S2，接種前在固體培養(yǎng)基中加入蠶蛹液并涂布均勻；

S3，通過條件差異培養(yǎng)提高培養(yǎng)基中蟲草素含量：

將提前備好的產(chǎn)蟲草素菌種接種于固體培養(yǎng)基中，于14-20℃下黑暗培養(yǎng)6-10d后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度至18-30℃繼續(xù)黑暗培養(yǎng)14-20d，然后進(jìn)行晝夜變換培養(yǎng)；

所述晝夜交替培養(yǎng)具體為：白天在溫度18-30℃、光照200-500lx下培養(yǎng)12-14h，夜間在黑暗條件，溫度為10-12℃下培養(yǎng)10-12h；

上述所述晝夜交替培養(yǎng)時(shí)間為8-12d；

然后調(diào)整光照為1000-2500lx，溫度于18-30℃下繼續(xù)培養(yǎng)2-4d；

S4，去除S2中培養(yǎng)基中的子實(shí)體，檢測培養(yǎng)基中蟲草素含量。

2.如權(quán)利要求1所述的獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，S1中，所述固體培養(yǎng)基中椰子殼顆粒是由椰子殼粉碎成粒徑為5-7mm的顆粒。

3.如權(quán)利要求1所述的獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，S1中，所述蠶蛹粉、甘氨酸、腺嘌呤和蒸餾水混合用量比為1g：1g：1g：100-200ml。

4.如權(quán)利要求3所述的獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，S1中，所述固體培養(yǎng)基分裝在培養(yǎng)罐中，分裝量為18-22g/罐。

5.如權(quán)利要求4所述的獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，S2中，所述蠶蛹液添加量為40-60μl/罐。

6.如權(quán)利要求1所述的獲得高產(chǎn)蟲草素的方法，其特征在于，S3中，所述菌種為蛹蟲草。