[發明專利]一種新冠病毒抗體檢測熒光試劑與制備方法

有效

• 申請號: 202010796340.5
• 申請日: 2020-08-10
• 公開（公告）號: CN112034179B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發明（設計）人: 劉歡;徐可;李華曜;翟博慧;龍文博;李龍;胡志響;陳浩
• 申請（專利權）人: 華中科技大學;武漢大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/533
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 許恒恒;李智

1.一種新冠病毒抗體檢測熒光試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)合成可見光熒光膠體量子點；所述可見光熒光膠體量子點的尺寸為1～20nm，量子點表面有親水配體，能夠分散在水基溶液形成膠體；

(2)在所述可見光熒光膠體量子點的表面標記預先準備的新冠病毒抗原多肽，所述新冠病毒抗原多肽其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，該新冠病毒抗原多肽能夠對目標病毒抗體即COVID-19新型冠狀病毒特異性抗體產生特異性結合反應，從而得到表面對目標病毒抗體具有特異性結合反應的量子點熒光試劑；該量子點熒光試劑與目標病毒抗體產生特異性結合反應后，其熒光特性將發生變化。

2.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述量子點熒光試劑為能夠對IgG具有特異性結合反應的IgG檢測用量子點熒光試劑、能夠對IgM具有特異性結合反應的IgM檢測用量子點熒光試劑、或能夠對IgA具有特異性結合反應的IgA檢測用量子點熒光試劑。

3.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述量子點熒光試劑包括能夠對IgG具有特異性結合反應的IgG檢測用量子點熒光試劑、能夠對IgM具有特異性結合反應的IgM檢測用量子點熒光試劑、以及能夠對IgA具有特異性結合反應的IgA檢測用量子點熒光試劑中的至少1種。

4.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述可見光熒光膠體量子點具體為熒光波長在可見光范圍內的不同的多種量子點；所述可見光熒光膠體量子點選自硒化鎘膠體量子點、碲化鎘膠體量子點、硒化鎘/硫化鋅核殼結構膠體量子點、銫鉛溴鈣鈦礦量子點、銫鉛碘鈣鈦礦量子點，其中，所述硒化鎘/硫化鋅核殼結構膠體量子點是以硒化鎘為核、硫化鋅為殼的核殼結構膠體量子點。

5.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在所述可見光熒光膠體量子點的表面標記預先準備的病毒抗原多肽具體是采用交聯法或配體交換法；

其中，所述交聯法是使用戊二醛、琥珀酰亞胺-4-環已烷-1-碳酸酯(SMCC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)作為交聯劑將病毒抗原多肽標記在量子點表面；所述配體交換法是將抗原多肽溶液直接與膠體量子點混合進行表面置換反應，使抗原多肽直接替換量子點表面的有機物配體而標記在量子點表面。

6.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，量子點經病毒抗原多肽標記后進行表面封閉；

所述表面封閉步驟是使用牛血清蛋白(BSA)將量子點表面蛋白質結合位點進行封閉。

7.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，量子點材料還經過純化處理；

所述純化處理步驟用超濾管將樣品濃縮純化，終產物復溶于緩沖液中。

8.如權利要求1－7任意一項制備方法制備得到的新冠病毒抗體檢測熒光試劑。