[發明專利]一種檢測桑枝中1-脫氧野尻霉素含量的試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202010791045.0
• 申請日: 2020-08-07
• 公開（公告）號: CN111965278A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 朱方容;陶程;李韜;邱長玉;崔秋英;林強;朱光書;王霞;陳芳;石華月
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區蠶業技術推廣站
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 符繼超

本發明公開了一種檢測桑枝中1?脫氧野尻霉素含量的試劑盒及方法，具體包括將桑枝粉碎的樣本粉末；采用超純水溶解樣本粉末，依次經過超聲、離心處理，得待測樣品提取液；待測樣品提取液采用1?脫氧野尻霉素衍生化試劑盒進行衍生化處理，得到待測液；再利用液相色譜準確測定待測液中1?脫氧野尻霉素含量。本發明公開的檢測試劑盒及利用其檢測桑枝中1?脫氧野尻霉素含量的方法，操作簡單、結果準確，證明桑枝中含有較高含量的DNJ，有利于桑枝提取DNJ的發展和桑樹的綜合利用。

技術領域

本發明涉及桑樹中生理活性物質研究技術領域，更具體的說是涉及一種檢測桑枝中1-脫氧野尻霉素含量的試劑盒及方法。

背景技術

桑樹(Morus albaL.)是桑科，桑屬落葉喬木或灌木，高可達15米。葉為桑蠶飼料，木材可制器具，枝條可編籮筐，桑皮可作造紙原料，桑椹可供食用、釀酒，葉、果和根皮均可入藥。早在《本草綱目》中就有記載：“桑葉乃手足陽明之藥，汁煎代茗，能止消渴，明目長發”，即證明桑葉具有要用效果。而桑白即桑根的皮，具有消渴、消腫、瀉下及治鼻衄、降壓、抗炎、抗癌等治療效作用和生物活性。桑椹即桑果，富含果糖、果酸、果膠、天然色素、白藜蘆醇，Vc、B1、B2等7種維生素，人體必須的鐵、鈣、鋅、硒、錳等16種微量元素及氨基酸，具有補血、益腎、明目、烏發、抗衰老、降血壓、預防慢性肝炎、治療失眠和神經衰弱等多種醫療保健功能。

桑葉、桑白、桑果之所以有藥效是因為含有生理活性物質。1-脫氧野尻霉素(DNJ)是桑樹中的一種哌啶類生物堿，是桑葉、桑白、桑果中的特征成分?，F代藥理實驗證明，DNJ在治療糖尿病和抗菌消炎等方面具有良好的作用，具有明顯抑制食后血糖急劇升高、延緩糖尿病發作和惡化等作用，并且還具有抑制腫瘤轉移和病毒活性等作用。

為了研究和推廣需要尋求大量提取DNJ的方法，但是桑葉、桑果、桑白中雖然含有DNJ，但是由于原料成本高、資源有限，造成提取DNJ成本較高。而桑枝主要指桑樹的一年生及半年生枝條，桑樹每年需要剪伐桑枝1～2次，產生大量的桑枝資源，成本低廉。但是，采用現有檢測桑枝中DNJ等活性物質含量時，粉碎處理因桑枝皮層纖維多不易粉碎，過篩時去除皮層纖維，而DNJ等活性物質在皮層纖維中含量不容忽視，從而導致檢測桑枝中DNJ等活性物質含量低，所以預計提取效果低、提取成本高，嚴重限制了由桑枝提取DNJ的發展。

因此，提供一種準確、簡單的檢測桑枝中1-脫氧野尻霉素含量的主要試劑盒及使用是本領域技術人員亟需解決的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種檢測桑枝中1-脫氧野尻霉素含量的試劑盒及方法，檢測結果準確，操作簡單有利于桑枝提取DNJ的發展。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明公開了一種1-脫氧野尻霉素衍生化試劑盒，包括盒身以及與所述盒身鉸接的盒蓋，所述盒身內固定有瓶架，其特征在于，所述瓶架頂面向內形成凹槽，所述凹槽內安裝有第一標準液瓶、第二標準液瓶、第三標準液瓶、第四標準液瓶、第五標準液瓶、第六標準液瓶、A液瓶、B液瓶、C液瓶和D液瓶。

上述優選技術方案的有益效果是：操作簡單、節省試劑、檢測準確。

本發明還公開了一種檢測桑枝中1-脫氧野尻霉素含量的方法，包括如下步驟：

(1)將桑枝粉碎，得到樣本粉末密封，測定樣本粉末的含水率；

(2)采用超純水浸溶樣本粉末，依次經過超聲、離心處理，得待測樣品提取液；

(3)取待測樣品提取液采用上述公開的衍生化試劑盒進行衍生化處理，得到待測液；

(4)利用液相色譜儀檢測1-脫氧野尻霉素衍生化試劑盒的標準液，將檢測結果與標準液建立標準曲線，再將待測液經過液相色譜儀檢測得到峰面積，根據檢測得到的峰面積與標準曲線確定桑枝中1-脫氧野尻霉素的含量。