[發明專利]一種α-L-艾杜糖苷酶活性的檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010786417.0
• 申請日: 2020-08-07
• 公開（公告）號: CN111893161A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 劉立明;齊曉麗;唐贊;王瑞;盧孟孟;馬蒙蒙;王永凱;胖鐵良;李建中
• 申請（專利權）人: 北京中科醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/34
• 分類號: C12Q1/34
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張換君

本發明公開了一種α?L?艾杜糖苷酶活性的檢測試劑盒，屬于醫學診斷領域，該檢測試劑盒包括反應液、沉淀劑、終止液、線性標準品、對照品，其中，所述線性標準品為4?甲基傘形酮溶液，所述反應液為4?甲基傘形酮酰?β?D?吡喃半乳糖苷溶液；該試劑盒可以快速、準確進行人體血液樣本中α?L?艾杜糖苷酶活性的體外檢測，通過對采集的濾紙干血片樣本或靜脈血樣本進行檢測，可實現批量化快速、便捷、準確輔助診斷粘多糖貯積癥I型患者的目的，該試劑盒檢測靈敏度高、選擇性好、抗干擾能力強、可重現性好、操作簡便，產品穩定性好，易于臨床使用。

技術領域

本發明涉及醫學診斷領域，特別是涉及一種α-L-艾杜糖苷酶活性的檢測試劑盒。

背景技術

粘多糖代謝障礙是由于人體細胞的溶酶體內降解粘多糖的水解酶發生突變導致其活性喪失，粘多糖不能被降解代謝，最終貯積在體內而發生的X連鎖的隱性遺傳病。該病是溶酶體貯積病中非常重要的一類，可分為Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅵ，Ⅶ，Ⅸ型等7種型，雖然各型致病基因和臨床表現有差異，但由于貯積的底物都是粘多糖而被統稱為粘多糖代謝障礙。

粘多糖是一種長鏈復合糖分子，由己糖醛酸和氨基己糖或中性糖組成的二糖單位彼此相連而形成，可與蛋白質相連形成蛋白多糖，而蛋白多糖又是結締組織基質、線粒體、核膜、質膜等的重要組成成分。粘多糖可沉積于機體的任何部分，包括皮下結締組織、關節、頭顱、心臟瓣膜、內臟、呼吸道系統并造成器質性的損傷，因此具有典型的臨床癥狀表現。

粘多糖貯積癥(Mucopolysaccharidoses，MPS)是我國最常見的一組進行性粘多糖代謝障礙遺傳病，占比高達40％。粘多糖貯積癥II型屬于X連鎖隱性遺傳病，而其他類型均為常染色體隱性遺傳。粘多糖貯積癥最早是由Brante通過組織化學分析提出。但事實上，早在1917和1919年Hunter和Hurler便已發表相關的臨床表現的描述，但是由于其病因一直未明，直至70年代初才確認其屬于溶酶體貯積癥。其中的MPSII型為分布僅次于戈謝病的疾病，是我國的第二高發的單個溶酶體貯積癥(20％)。此外，MPSI型和MPSIV型也是中國人群中較為常見的粘多糖貯積癥類型。此組疾病最常見的表現主要為面容粗陋、骨骼異常、伴或不伴有智力落后等，是我國認識和研究稍多的一組疾病。

目前，國內臨床上診斷粘多糖貯積癥暫無快速、便捷的診斷試劑產品，通常主要通過基因的突變檢測、CT、X線等手段結合典型臨床癥狀如面容改變、皮膚粗糙、關節變形、臟器受累等進行診斷。但針對缺乏典型臨床癥狀的患者，上述手段均不能有效達到早期診斷的目的，且存在操作復雜、費用昂貴、多次反復對患者二次傷害的弊端，也不能作為一種更直接的診斷標準進行該疾病的診斷。

發明內容

本發明的目的是提供一種α-L-艾杜糖苷酶活性的檢測試劑盒，以解決上述現有技術存在的問題，該試劑盒通過測定濾紙干血片血液樣本或靜脈血液樣本中α-L-艾杜糖苷酶活性，輔助診斷粘多糖貯積癥Ⅰ型患者，具有微量、快速、便捷的特點，解決了目前暫無同類成熟檢測試劑盒產品使用的問題。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種α-L-艾杜糖苷酶活性的檢測試劑盒，包括反應液、沉淀劑、終止液、線性標準品、對照品，其中，所述線性標準品為4-甲基傘形酮溶液，所述反應液為4-甲基傘形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷溶液。

進一步地，所述4-甲基傘形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷溶液為酸性溶液，由緩沖液調節pH。

進一步地，所述4-甲基傘形酮酰-β-D-吡喃半乳糖苷溶液的pH為4.0～6.0；

所述緩沖液為選自醋酸-醋酸鈉緩沖液、PBS緩沖液、Goods緩沖液、tris緩沖液、檸檬酸鈉-磷酸氫二鉀緩沖液、mops緩沖液、磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液、pipes緩沖液和hepes緩沖液中的至少一種。