[發(fā)明專利]利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010786303.6
• 申請(qǐng)日: 2020-08-07
• 公開（公告）號(hào): CN111979171B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李悅明;徐建春;梁榮榮;韓萍;徐炳政
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島科海生物有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/38
• 分類號(hào): C12N1/38;C12N1/16;C12R1/72
• 代理公司: 青島智地領(lǐng)創(chuàng)專利代理有限公司 37252
• 代理人: 陳海濱

1.一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于，依次包括以下步驟：

步驟一、取異麥芽酮糖結(jié)晶后的母液，稀釋至糖度為10°Be′，得溶液一；

步驟二、將玉米面和水混合均勻，再向其中加入淀粉酶和糖化酶，在55-60℃保溫一段時(shí)間，稀釋至糖度為10°Be′，得溶液二；其中玉米面與水的質(zhì)量體積比為18：100kg/L；

步驟三、將所述的溶液一、溶液二和小球藻廢液混合，得培養(yǎng)液，將所得培養(yǎng)液滅菌備用；溶液一、溶液二和小球藻廢液的質(zhì)量配比為1：1：2，培養(yǎng)液在溫度為115℃時(shí)滅菌20min；

步驟四、種子制備：無菌條件下，從保藏的斜面上挑取一環(huán)產(chǎn)朊假絲酵母菌接種于滅菌的YPD基礎(chǔ)培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，得種子液；

步驟五、營(yíng)養(yǎng)成分過渡：取步驟三中滅菌前的培養(yǎng)液以2%比例加入瓊脂，115℃滅菌20min后傾倒平板；取步驟四中的種子液1mL梯度稀釋，涂布于固體培養(yǎng)基平板上，30℃培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48h；

步驟六、擴(kuò)培：挑取菌落個(gè)頭大、濕潤(rùn)粘稠、顏色啞光的菌落接種于步驟三滅菌后的培養(yǎng)液中，進(jìn)行培養(yǎng)；

步驟七、發(fā)酵培養(yǎng)：取步驟六中擴(kuò)培后的種子液，以10% V/V接種量接種于步驟三滅菌后的培養(yǎng)液中，在一定條件下培養(yǎng)后加入25-30mg/L亞硝酸硒，培養(yǎng)24h，再次加入15-20mg/L亞硝酸硒，與此同時(shí)，以10%比例補(bǔ)料步驟三滅菌后的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)12-16h，發(fā)酵終點(diǎn)測(cè)定酵母生物量、單位硒含量和總硒含量；

步驟八、酵母生物量測(cè)定：將發(fā)酵終點(diǎn)所得發(fā)酵液經(jīng)離心后收集菌體，在該菌體中加入蒸餾水沖洗三次，冷凍干燥至恒定重量時(shí)稱重，即得富硒酵母。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于：步驟四的培養(yǎng)條件為：溫度30℃，在180r/min的搖床培養(yǎng)16h。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于：步驟六中的培養(yǎng)條件為：溫度30℃，在180r/min的搖床培養(yǎng)16h。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于：步驟七中第一次培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為30℃，通氣量100L/h，攪拌轉(zhuǎn)速200r/min，培養(yǎng)10h。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于：步驟八中，發(fā)酵終點(diǎn)的發(fā)酵液在4000r/min離心10min。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種利用異麥芽酮糖母液和小球藻廢液生產(chǎn)富硒酵母的方法，其特征在于：步驟一、步驟二中的糖度用阿貝斯折光儀來測(cè)定。