[發明專利]二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的純化方法及應用

有效

• 申請號: 202010785516.7
• 申請日: 2020-08-06
• 公開（公告）號: CN111808154B
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 李晉;常艷旭;楊玉喬;何俊;劉睿;龐曉麗
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學
• 主分類號: C07H15/26
• 分類號: C07H15/26;C07H1/08;C07H1/06;A61K31/7028;A61P29/00
• 代理公司: 北京柏杉松知識產權代理事務所(普通合伙) 11413
• 代理人: 劉繼富;王春偉

本發明提供了二氫歐山芹醇?β?D?葡萄糖苷的純化方法及其在制備鎮痛藥物中的應用，所述純化方法包括將獨活提取物經大孔樹脂富集后經制備高效液相色譜純化，本申請的方法成本低，收率高，操作簡單，環境友好。發明人進一步對純化的二氫歐山芹醇?β?D?葡萄糖苷進行生理功能研究，發現二氫歐山芹醇?β?D?葡萄糖苷具有鎮痛活性，因此能夠用于制備鎮痛藥物。

技術領域

本發明涉及中藥活性物質分離純化技術領域，特別是涉及獨活提取物中二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的純化方法及應用。

背景技術

獨活(Angelicae?pubescentis?Radix)是重齒毛當歸的干燥根，在我國主要分布于四川、湖北兩省。作為一種古老的中藥，它已被廣泛用于治療關節痛和風濕病。發明人在前期研究中發現獨活水提取物中二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷(CBG，結構式如式Ⅰ)含量較高，可能是獨活的主要活性成分之一。現有技術中，從中藥提取物中純化活性成分主要采用加熱回流萃取結合硅膠柱色譜法，但該方法存在回收率低、耗時長、有機試劑浪費大、污染環境等問題，不適合工業化生產。因此，為了進一步的滿足CBG的研究需要，亟需發展一種CBG快速高效的純化方法，進而對其生物學活性進行研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種獨活提取物中二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的純化方法及應用。

本申請第一方面提供了一種從獨活提取物中純化二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的方法，包括：

(1)使獨活提取物的水溶液通過填充了GDX-201大孔樹脂的大孔樹脂填充柱，流速為3-5BV/h；其中，所述獨活提取物與大孔樹脂的質量比為(2-4)：1；所述聚二乙烯基苯大孔樹脂經體積分數95％以上的乙醇浸泡20-30小時后，用超純水沖洗至大孔樹脂中不含乙醇；

(2)先后以8-12BV超純水和8-12BV?4-6％乙醇水溶液沖洗大孔樹脂填充柱，以去除雜質；

(3)以20-30％乙醇水溶液洗脫獲得含有二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的餾分，濃縮，干燥，獲得二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷粗品；

(4)將所述二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷粗品溶于甲醇、乙腈或制備高效液相色譜的初始流動相中，配制成濃度為50-150mg/L的溶液；

(5)采用制備高效液相色譜對步驟(4)的溶液進行純化，色譜條件包括：

色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，流速為8-10mL/min；流動相：A相為水，B相為乙腈；20-100％B相梯度洗脫；進樣量0.5-1.5mL；檢測波長為325nm。

本申請第二方面提供了本申請第一方面的方法所制備的二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷。

本申請第三方面提供了本申請第一方面的方法所制備的二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷在制備鎮痛藥物中的用途。

本申請第四方面提供了一種用于鎮痛的藥物組合物，包含二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷以及任意藥學上可接受的載體和/或賦形劑。

本發明實施例提供的獨活提取物中二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷的純化方法，利用大孔樹脂對獨活提取物中的二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷進行富集，進而采用制備高效液相色譜進行純化，成本低，收率高，操作簡單，環境友好。發明人進一步對純化的二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷進行生理功能研究，發現二氫歐山芹醇-β-D-葡萄糖苷具有鎮痛活性，因此能夠用于制備鎮痛藥物。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。