[發明專利]一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法

有效

• 申請號: 202010785027.1
• 申請日: 2020-08-06
• 公開（公告）號: CN111748603B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 李永剛;扈光輝;劉金鑫;任洪雷;胡少新
• 申請（專利權）人: 東北農業大學;黑龍江省農業科學院玉米研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;A01H1/04
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 孫光遠

本發明公開了一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法。屬于農業技術領域。包括下列步驟：孢子懸浮液的配制、玉米抗性資源的準備、接種和統計數據；其中，接種：用注射器在距離地面1.2～1.7cm、注射器針頭與莖成45°插入到莖的中心位置并縮回0.18～0.22cm后，注入1.4～1.6ml孢子懸浮液；拔出針頭，正常管理和統計數據；統計數據：待接種25d后，統計植株發病情況，計算病情指數，并按病情指數確定抗感類型。本發明省時、省力、接種速度快，適合大量玉米抗性材料的篩選和調查。

技術領域

本發明涉及農業技術領域，更具體的說是涉及一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法。

背景技術

玉米(Zea?mays?L.)是一種重要的糧食作物和飼料，在全球20多個國家為3.1億人提供食物，占人類飲食總熱量的20～30％。可靠的玉米生產是維持中國糧食安全和農業穩定的必要條件。然而，由各種病原菌引起的玉米莖腐病是世界上大多數玉米產區發生的最具破壞性的病害之一。玉米莖腐病是造成許多國家玉米產量和品質嚴重下降的原因，并已成為中國玉米生產的主要挑戰之一。選育和利用抗病品種是最有效最經濟的方法。而抗病品種的選育和篩選主要通過人工接種進行抗病性鑒定，適合的接種方法是非常關鍵的。

但是，國內外對玉米莖腐病的人工接種尚無統一的標準。常用的接種方法有埋入法、牙簽法、鉆孔法和注射法。這些方法中應用最多的人工接種的方法是根埋法，而埋根法發病率低，受環境影響大，接種效果穩定性差，且準備接種體和接種過程復雜工作量大。也有牙簽法，其準備階段工作量大，接種量不容易控制，不適合作大量的玉米抗性資源的鑒定。傳統的已經報道的注射法是采用普通注射器接種，接種時期為玉米生長中后，用電鉆將根莖部打孔后，用注射器將菌懸液注射到莖部，用凡士林堵住接種部位，該方法工作量大，后期發病不容易調查。目前，所報道的接種方法，均不適合大批量抗性材料的鑒定，

因此，提供一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法，適合大量玉米抗性材料的篩選和調查是本領域技術人員亟需解決的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種玉米品種抗莖基腐病人工接種鑒定方法，包括下列步驟：

(1)孢子懸浮液的配制：將樣本菌培養制備孢子懸浮液備用；

(2)玉米抗性資源的準備：種植玉米，待玉米長至6～8葉期接種；

(3)接種：用注射器在距離地面1.2～1.7cm、注射器針頭與莖成45°插入到莖的中心位置并縮回0.18～0.22cm后，注入1.4～1.6ml步驟(2)所述孢子懸浮液；

(4)統計數據：待接種25d后，統計植株發病情況，計算病情指數，并按病情指數確定抗感類型。

有益效果在于，通過優選接種位置有利于懸浮液注射，避免堵塞針頭。有利于為后期的統計分析工作打下堅實的雞翅。；

優選的：步驟(1)樣本菌的來源：市售代表菌株或經組織分離法對病株組織分離培養鑒定得到。

優選的：組織分離法對病株分離培養：取病健交接部分的組織，置于酒精中浸泡，取出置于升汞中浸泡，再經無菌水換洗，曬干后轉移至PDA平板上封口，置于25～27℃環境，黑暗培養2～3d，挑取菌落進行純化，備用。

有益效果在于：采取上述措施可以快速殺死表面雜菌，不影響真正病原菌分離，且簡單和快捷。

優選的：酒精為質量體積比75％酒精，浸泡時間2～3s，所述升汞質量體積比0.1％，浸泡時間2～3min。

有益效果在于：處理時間過長，會把組織內的病原菌也都殺死，無法分離玉米莖基腐病菌，處理時間過短，組織表面的雜菌殺不死，無法分出真正的病原菌。