[發(fā)明專利]一種高純度酶改制甜菊糖苷及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010783270.X
• 申請(qǐng)日: 2020-08-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111850071A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周愛(ài)琴;周愛(ài)兵;于茂蘭;張璐璐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇史蒂文生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P19/56
• 分類號(hào): C12P19/56;C07H15/256;C07H1/00;C07H1/06
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 王佳妹

1.一種高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟S1：將甜菊糖苷與糊精溶解在水中；

步驟S2：在步驟S1的溶液中添加反應(yīng)酶，攪拌均勻；

步驟S3：將步驟S2的溶液在60-70℃條件下反應(yīng)24-48h；

步驟S4：待步驟S3的反應(yīng)完成后，添加糊精繼續(xù)反應(yīng)5h，添加量為步驟S1中的糊精量的10％-20％；

步驟S5：將步驟S4中的反應(yīng)物升溫至90-105℃，將酶滅活；

步驟S6：冷卻后，將步驟S5的反應(yīng)溶液用活性炭過(guò)濾，除去顏色和雜質(zhì)；

步驟S7：將步驟S6中獲得的溶液配制成質(zhì)量濃度為1％-5％的溶液，過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，直至溶液吸附完全，流速為1BV/h，再用2倍吸附柱體積的水沖洗吸附柱，洗掉殘留的糊精；

步驟S8：用4倍吸附柱體積的體積分?jǐn)?shù)為40％-50％的乙醇溶液洗脫，將大孔吸附樹(shù)脂樹(shù)脂間的未反應(yīng)的甜菊糖苷和酶改制甜菊糖苷混合物洗脫下來(lái)，流速為0.5BV/h；流出液紫外吸光度大于0.1-0.3時(shí)收集1-1.5BV體積的流出液；

步驟S9：將流出液濃縮后噴干，獲得酶改制甜菊糖苷。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述步驟S1中，甜菊糖苷與糊精的質(zhì)量比為1：0.5-3，且甜菊糖苷的質(zhì)量濃度為1％-20％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述步驟S2中，所述反應(yīng)酶添加量為甜菊糖苷質(zhì)量的1％-5％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中，在反應(yīng)期間勻速攪拌反應(yīng)溶液，轉(zhuǎn)速為50-100rpm/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述糊精選用環(huán)糊精或麥芽糊精，或替換為淀粉。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述糊精的DE值為10-15。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述甜菊糖苷的純度至少為80％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述反應(yīng)酶選用環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶，或環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶與α-淀粉酶按質(zhì)量比1:1形成的聯(lián)合酶。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法，其特征在于，所述步驟S9中，將流出液濃縮后噴干的步驟是先將流出液濃縮成質(zhì)量濃度為40％-50％的料液，再進(jìn)行噴霧干燥處理，在噴霧干燥機(jī)內(nèi)真空度達(dá)到-95kpa時(shí)進(jìn)料，進(jìn)料速度為120kg/h，進(jìn)風(fēng)口溫度為195℃，出風(fēng)口溫度為95℃。

10.如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的高純度酶改制甜菊糖苷的制備方法所制備的酶改制甜菊糖苷，其特征在于，所述酶改制甜菊糖苷的純度至少為80％。