[發明專利]一種熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010779919.0
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN111892584B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 陳春英;周會鴿;李佳陽;郭夢雨;趙宇亮
• 申請（專利權）人: 國家納米科學中心
• 主分類號: C07D413/12
• 分類號: C07D413/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種熒光探針，其特征在于，所述熒光探針具有如下式I所示結構：

2.根據權利要求1所述的熒光探針的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

(1)將fmoc基團保護的賴氨酸溶解在第一混合溶劑中，使其與4-氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑接觸，得到式Ⅱ所示化合物；

(2)在第二溶劑中，使碳二亞胺縮合劑、?；罨瘎┖褪舰蛩净衔镆约?-苯基-3-[(4-氨甲基)氮雜環己烷]-2-丙醇接觸，得到式Ⅲ所示的化合物；

(3)在第三有機溶劑中，使式Ⅲ所示的化合物發生fmoc脫保護反應，得到式Ⅰ所示的熒光探針。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述fmoc基團保護的賴氨酸與4-氯-7硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑的摩爾比為1:0.5-10。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述fmoc基團保護的賴氨酸與4-氯-7硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑的摩爾比為1:1。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述第一混合溶劑為甲醇和水的混合物或者DMF和三乙胺的混合物。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述第一混合溶劑為甲醇和水的混合物，所述甲醇和水的體積比為6:5。

7.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述接觸的溫度為10-35℃。

8.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述接觸的時間為6-24小時。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述接觸的時間為12小時。

10.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)還包括將fmoc基團保護的賴氨酸加入第一混合溶劑后，用碳酸鈉調節反應液pH值至9-10。

11.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)還包括所述接觸后，將最終反應液pH調為酸性，收集析出沉淀，并用飽和食鹽水將pH值洗回中性，將粗產物真空干燥后，溶于甲醇與水的混合溶劑，并使用高效液相分離純化。

12.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述將最終反應液pH調為酸性時所用的pH調節劑為鹽酸。

13.根據權利要求12所述的制備方法，其特征在于，所述鹽酸為1M的鹽酸。

14.根據權利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述使用高效液相分離純化時，使用乙腈和水為洗脫液，以20：80體積比為初始梯度，100:0體積比為終止梯度進行梯度淋洗。

15.根據權利要求14所述的制備方法，其特征在于，所述梯度淋洗時間為20-40min。

16.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述第二溶劑為二甲基亞砜和甲醇的混合物、二氯甲烷和甲醇的混合物、N,N'-二甲基甲酰胺與甲醇的混合物或N,N'-二甲基甲酰胺。

17.根據權利要求16所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述第二溶劑為N,N'-二甲基甲酰胺與甲醇的混合物。

18.根據權利要求17所述的制備方法，其特征在于，所述N,N'-二甲基甲酰胺與甲醇的體積比為10：0-5。