[發明專利]一種熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010779919.0
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN111892584B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 陳春英;周會鴿;李佳陽;郭夢雨;趙宇亮
• 申請（專利權）人: 國家納米科學中心
• 主分類號: C07D413/12
• 分類號: C07D413/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明提供一種熒光探針及其制備方法和應用，所述熒光探針具有式I所示結構，該熒光探針保留了賴氨酸主鏈上的伯氨基，有利于該分子后期與納米顆粒等的結合，可以實現對末端為羧基的分子或納米材料的熒光標記，可用于腫瘤細胞的熒光成像，為腫瘤細胞的檢測和治療提供有利幫助，并且其對細胞無毒性，安全性高。

技術領域

本發明屬于化學成像材料領域，涉及一種熒光探針及其制備方法和應用。

背景技術

熒光成像是非常重要的成像方式，由于其簡單、快速和靈敏度高的優點被廣泛應用于生物醫藥領域。NBD(4-氯-7硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑)是一種用途廣泛的熒光分子，經常被用來標記蛋白、納米顆粒等末端擁有氨基官能團的材料，卻不能用于標記末端為羧基的分子或納米材料。因此，在本領域中期望能夠開發出更多NBD類的熒光探針以滿足生物醫藥領域的需求。

CN109734709A公開了一種小分子熒光探針，其具有如下結構：

該熒光探針結合金屬離子后能發射很強的熒光，可實現檢測鎵離子和鉻離子，但該熒光探針并不適用于細胞成像領域。

CN104478823A公開了一種賴氨酸修飾的苯并呋咱化合物，其具有如下結構：該化合物可以特異性檢測銅離子，能夠作為人體中由于銅離子在細胞中失衡導致抑制神經性的疾病以及內分泌紊亂的檢測探針，對于醫藥領域具有重要意義，但是該探針是特異性檢測銅離子的，并不能單獨用于細胞的熒光成像。

因此，在本領域期望能夠開發能用于標記末端為羧基的分子或納米材料的NBD類的熒光探針，用于細胞的熒光檢測。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種熒光探針及其制備方法和應用。本發明的熒光探針將熒光分子NBD與1-苯基-3-[(4-氨甲基)氮雜環己烷]-2-丙醇(哌莫苯)通過賴氨酸進行偶聯，構建新型熒光成像探針。本探針保留了賴氨酸主鏈上的伯氨基，有利于該分子后期與納米顆粒等的結合，能夠實現在細胞中的熒光成像。

為達到此發明目的，本發明采用以下技術方案：

一方面，本發明提供一種熒光探針，所述熒光探針具有如下式I所示結構：

該熒光探針的化學命名為：1-(1-苯基-3-[(4-氨甲基)氮雜環己烷]-2-丙醇)-6-(4-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑)-賴氨酸(1-(1-phenyl-3-[(4-aminomethyl)azacyclohexane]-2-propanol-6-(4-nitro-2,1,3-benzoxadiazole)-lysin，簡稱BLN)，是一種橘紅色粉末，分子簡式為：C₂₇H₃₇N₇O₅，分子量：539.29。

在本發明中該熒光探針保留了賴氨酸主鏈上的伯氨基，有利于該分子后期與納米顆粒等的結合，可以實現對末端為羧基的分子或納米材料的熒光標記，可用于細胞的熒光成像，例如可用于腫瘤細胞熒光成像，為腫瘤細胞的檢測和治療提供有利幫助，并且其對正常細胞無毒性，安全性高。

另一方面，本發明提供了如上所述的熒光探針的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

(1)將fmoc基團保護的賴氨酸(fmoc-lys)溶解在第一混合溶劑中，使其與4-氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1,3-二唑(NBD)接觸，得到式Ⅱ所示化合物(fmoc-lys-NBD)；

(2)在第二溶劑中，使碳二亞胺縮合劑、酰化活化劑和式Ⅱ所示化合物以及哌莫苯接觸，得到式Ⅲ所示的化合物fmoc-(pimobenzene)-lys-NBD(fmoc-BLN)；