[發明專利]β-葡聚糖的制備工藝

有效

• 申請號: 202010777784.4
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN111778301B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 田軍;劉青;盧伊娜
• 申請（專利權）人: 上海珈凱生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/08
• 分類號: C12P19/08;C12N1/14;C08B37/02;C12R1/645
• 代理公司: 上海邦德專利代理事務所(普通合伙) 31312
• 代理人: 袁步蘭

本發明公開了一種β?葡聚糖的制備工藝，先進行菌種篩選，準備若干株菌種，并利用剛果紅瓊脂染色法對其定性檢測，檢測各個菌種的β?1,3?葡聚糖酶活，篩選較高酶活的菌種作為待培養菌種。再對菌種進行培養，先通過斜面種子培養7?8d，再接種至平板培養基進行培養，其中平板培養基各組分包括葡萄糖28?30g/L、磷酸二氫鉀1?2g/L、酵母浸膏6?10g/L、瓊脂18?20g/L、硫酸鎂1?2g/L、氯化銨2?3g/L。本申請公開了一種β?葡聚糖的制備工藝，工藝設計合理，操作簡單，本申請通過對裂褶菌發酵、分離提純，并優化改進各個參數步驟，制備得到β?葡聚糖，該產物水溶性好、生物活性高，且產品的粗糖得率、保留率和純度較高，可應用于大規模生產，成本低，具有較高的實用性。

技術領域

本發明涉及β-葡聚糖制備技術領域，具體是一種β-葡聚糖的制備工藝。

背景技術

葡聚糖，指以葡萄糖為單糖組成的同型多糖，葡萄糖單元之間以糖苷鍵連接，其中根據糖苷鍵的類型又可分為alpha-葡聚糖和beta-葡聚糖。

beta-葡聚糖(β-葡聚糖)活性結構是由葡萄糖單位組成的多聚糖，它們大多數通過β-1,3結合，這是葡萄糖鏈連接的方式。它能夠活化巨噬細胞、嗜中性白血球等，因此能提高白細胞素、細胞分裂素和特殊抗體的含量，全面刺激機體的免疫系統；同時β-葡聚糖還具有清除游離基、抗輻射、溶解膽固醇，預防高脂血癥等作用，可廣泛用于醫藥、食品、化妝品等領域。

現如今，β-葡聚糖的生產已經步入規模化，但現有的生產工藝制備得到成品的純度較低，生產過程中脫色、脫蛋白步驟損耗較大，使用效果差。

針對該問題，我們提供一種β-葡聚糖的制備工藝，以解決該問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種β-葡聚糖的制備工藝，以解決現有技術中的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種β-葡聚糖的制備工藝，包括以下步驟：

1)菌種篩選；

2)菌種培養；

3)發酵；

4)粗提脫色；

5)脫蛋白；

6)得到β-葡聚糖成品。

較優化的方案，包括以下步驟：

1)菌種篩選，得到待培養菌種；

2)菌種培養；取待培養菌種，斜面種子培養7-8d，培養溫度為26-28℃，再接種于平板培養基中，25-30℃下培養7-8d，得到種子液；

3)發酵：取種子液，置于發酵罐中發酵7-8d，得到發酵液；

4)粗提脫色：發酵液進行γ射線輻照，輻照后靜置，接著進行高壓均質，離心分離，上清液為β-葡聚糖高壓均質粗提液，沉淀部分加水后置于-15℃下凍結3-4h，25-28℃水浴下解凍0.5-1h，重復凍融操作2-3次，進行微波提取，離心分離，收集上清液，與β-葡聚糖高壓均質粗提液合并，脫鹽濃縮，再加入大孔樹脂，搖床中處理9-10h，轉速為120-150r/min，處理溫度為20-28℃，得到脫色液；

5)脫蛋白：取脫色液，加入聚酰胺粉末，25-28℃下振蕩2-2.5h，抽濾，離心，取上清，加入乙醇醇析，析出物干燥，得到β-葡聚糖成品。

較優化的方案，包括以下步驟：

1)菌種篩選：準備菌種，分別進行剛果紅瓊脂染色法定性測試，檢測菌種的β-1,3-葡聚糖酶活，進行篩選，得到待培養菌種，備用；