[發明專利]基于Fe3

在審

• 申請號: 202010776818.8
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN112129939A
• 公開（公告）日: 2020-12-25
• 發明（設計）人: 李巧玉;施海梅;余紹寧
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/543;G01N21/64
• 代理公司: 浙江納祺律師事務所 33257
• 代理人: 應毓婷

1.基于Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子富集和PSMA傳感器檢測前列腺癌外泌體的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)合成Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子，與含前列腺細胞外泌體的樣本共孵育并磁性分離，實現外泌體的分離；

2)將分離得到的外泌體與PSMA傳感器共孵育，并獲得熒光強度信號，通過測得熒光強度的改變對外泌體進行定量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中，Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子制備方法如下：

1)將Fe₃O₄溶于乙醇、去離子水和氨水的混合物中，超聲，接著加入TEOS，室溫下連續攪拌反應，得到Fe₃O₄@SiO₂；

2)將Fe₃O₄@SiO₂溶于乙醇和氨水的混合物中，超聲后，用連續攪拌逐滴加入溶于乙醇的鈦酸四丁酯。連續攪拌反應，制備好的產品用超純水和乙醇洗滌，烘干后得到Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中，磁性分離后，堿液洗脫。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，洗脫步驟使用10％氨水與磁性分離得到的Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂/外泌體復合物震搖共孵育。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中，構建發卡狀PSMA傳感器如下：通過對PSMA抗體序列進行設計，使其形成發卡狀結構，并在相應3’端和5’修飾上羧基四甲基羅丹明熒光基團和偶氮苯甲酸猝滅基團。

6.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟2)中，PSMA抗體核苷酸序列如SEQNo.3所示。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中，獲得熒光強度的條件：激發光557納米，發射光580納米。

8.Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子，其特征在于，所述納米粒子制備方法如下：

1)將Fe₃O₄溶于乙醇、去離子水和氨水的混合物中，超聲，接著加入TEOS，室溫下連續攪拌反應，得到Fe₃O₄@SiO₂；

2)將Fe₃O₄@SiO₂溶于乙醇和氨水的混合物中，超聲后，用連續攪拌逐滴加入溶于乙醇的鈦酸四丁酯。連續攪拌反應，制備好的產品用超純水和乙醇洗滌，烘干后得到Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子。

9.Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子在前列腺癌外泌體檢測中的用途，其特征在于，Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子，與外泌體共孵育并磁性分離，實現外泌體的分離和富集。

10.前列腺癌外泌體檢測裝置，其特征在于，所述檢測裝置中采用Fe₃O₄@SiO₂@TiO₂納米粒子對外泌體進行分離富集，并與PSMA傳感器共孵育。