[發(fā)明專利]一種尿苷磷酸酶突變體及其應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010772689.5 | 申請日： | 2020-08-04 |
| 公開（公告）號： | CN111748537B | 公開（公告）日： | 2021-11-26 |
| 發(fā)明（設計）人： | 范文超;王金剛;梁巖;高書良;袁圣倫;任亮 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江華睿生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N15/54;C12N1/21;C12P19/38;C12P19/30;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海申浩律師事務所 31280 | 代理人： | 賈師英 |
| 地址： | 313000 浙江省湖州*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 磷酸酶 突變體 及其 應用 | ||
1.一種尿苷磷酸酶突變體，其氨基酸序列為SEQ ID NO:3。
2.編碼如權(quán)利要求1所述尿苷磷酸酶突變體的基因。
3.如權(quán)利要求2所述的基因，其特征在于，核苷酸序列為SEQ ID NO:4。
4.一種微生物，其表達如權(quán)利要求3所述的基因。
5.如權(quán)利要求4所述的微生物，其特征在于，所述微生物選自大腸桿菌、畢赤酵母、枯草芽孢桿菌。
6.一種生產(chǎn)如權(quán)利要求1所述尿苷磷酸酶突變體的方法，其特征在于，通過如權(quán)利要求5所述微生物的發(fā)酵獲得。
7.一種生產(chǎn)煙酰胺核糖的方法，其特征在于，以核糖-1-磷酸和煙酰胺為底物，使用如權(quán)利要求1所述的尿苷磷酸酶突變體催化合成煙酰胺核糖。
8.一種生產(chǎn)β-煙酰胺單核苷酸的方法，其特征在于，以鳥苷、磷酸鹽、煙酰胺和ATP為底物，使用由嘌呤核苷磷酸化酶、煙酰胺核糖激酶和如權(quán)利要求1所述的尿苷磷酸酶突變體構(gòu)成的三酶體系，催化一鍋法合成β-煙酰胺單核苷酸。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，反應體系為磷酸鹽緩沖液，pH5.0-9.0；反應溫度為30-40℃。
10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述煙酰胺核糖激酶是Saccharomycescerevisiae S288C來源的煙酰胺核糖激酶。
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