[發(fā)明專(zhuān)利]一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010768307.1
• 申請(qǐng)日: 2020-08-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111871396A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-11-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅堅(jiān);蘇志國(guó);向杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所
• 主分類(lèi)號(hào): B01J20/26
• 分類(lèi)號(hào): B01J20/26;B01J20/28;B01J20/286;B01J20/291;B01J20/30;B01D15/38;C07K1/16;G01N27/447
• 代理公司: 北京品源專(zhuān)利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發(fā)明涉及一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用，所述白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)包括基質(zhì)材料和通過(guò)雙氨基試劑偶聯(lián)到所述基質(zhì)材料表面的辛基琥珀酸酐。本發(fā)明所涉及的是一種新型的靜電親和雙模式層析介質(zhì)，可以用于血漿中白蛋白的直接提取，制備過(guò)程簡(jiǎn)單，成本低廉；蛋白吸附量大；對(duì)樣品無(wú)特殊要求；動(dòng)態(tài)吸附載量高；洗脫方便；產(chǎn)物純度高，直接從人、貓和犬等血漿中純化的白蛋白純度超過(guò)95％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用，尤其涉及一種白蛋白收率高、純度高的白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

血清白蛋白是血漿中含量最豐富的一種蛋白質(zhì)，約占血漿蛋白總含量的60％左右。血清白蛋白的主要生理功能是維持血液滲透壓和攜帶血液中多種配基(包括脂肪酸、氨基酸、類(lèi)固醇、金屬離子及藥物)與組織進(jìn)行交換，臨床用于手術(shù)輸血和危重病人補(bǔ)液，治療創(chuàng)傷休克、發(fā)燒、水腫和低白蛋白血癥等。人血清白蛋白(HSA)是治療各種重大疾病和重癥監(jiān)護(hù)的不可缺少的藥物，以及其他醫(yī)療和生物應(yīng)用。

目前人血清白蛋白的制備主要采用低溫乙醇沉淀工藝，其主干通常是Cohn法或其變法或簡(jiǎn)法。大規(guī)模生產(chǎn)中先將血漿蛋白分成幾個(gè)大的組分，再?gòu)钠渲蟹蛛x出不同的藥用蛋白。其中組分I中主要成分為纖維蛋白原、VIII因子等，組分II主要為丙種球蛋白，組分III主要為α及β球蛋白，組分IV主要為α及β球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，組分Ⅴ主要為白蛋白。

在CN104004084A、CN103394076A、US5346992A、US5250662等公開(kāi)的工藝中，白蛋白的分離主要以冷乙醇沉淀法得到組分V沉淀為原料，進(jìn)一步結(jié)合沉淀、超濾或?qū)游龅燃夹g(shù)提高純度。在沉淀過(guò)程中，白蛋白的收率較低，部分白蛋白隨組分I、組分II、組分III和組分IV沉淀而流失，還有一部分白蛋白殘留于組分V上清中。從組分I、組分II、組分III和組分IV沉淀中回收白蛋白的方法均有報(bào)道，例如從Kistler-Nitchmann工藝組分IV沉淀中回收白蛋白(劉鵬翰，從低溫乙醇法FIV組份中分離人血白蛋白的研究，藥物生物技術(shù)，1997(02):p.114-117)；蘇志國(guó)等以Cohn組分IV為原料，提取人血清白蛋白(CN102977180A)；張林等從低溫乙醇沉淀組分I+II+III中回收白蛋白(CN102311496A)。

CN105037487A公開(kāi)了一種人血白蛋白的制備方法，以健康人血漿上清為原料，采用Kistler-Nitchmann低溫乙醇法沉淀、分離組分I+II+III和組分IV，對(duì)組分IV分離后上清液進(jìn)行脫醇處理后，再配合一步離子交換層析，超濾，加入適量的辛酸鈉作為穩(wěn)定劑，經(jīng)巴氏病毒滅活處理后得到人血白蛋白成品。經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)該工藝制備的人血白蛋白的純度≥99％，多聚體含量≤1％，收率達(dá)到28-30g/L血漿。制品的純度更高，雜蛋白含量更低，使得臨床用藥更加安全。但是此方法緩沖液用量大，操作時(shí)間長(zhǎng)。

因此，開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單有效的從血漿或低溫乙醇沉淀組分提取白蛋白的方法，對(duì)于血漿蛋白的利用以及白蛋白的制備均有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用，尤其提供一種白蛋白收率高、純度高的白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用。

為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)，所述白蛋白靜電親和雙模式層析介質(zhì)包括基質(zhì)材料和通過(guò)雙氨基試劑偶聯(lián)到所述基質(zhì)材料表面的辛基琥珀酸酐。