[發(fā)明專利]一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質及其制備方法和應用

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• 申請日: 2020-08-03
• 公開（公告）號: CN111871396A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發(fā)明（設計）人: 羅堅;蘇志國;向杰
• 申請（專利權）人: 中國科學院過程工程研究所
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/28;B01J20/286;B01J20/291;B01J20/30;B01D15/38;C07K1/16;G01N27/447
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種白蛋白靜電親和雙模式層析介質，其特征在于，所述白蛋白靜電親和雙模式層析介質包括基質材料和通過雙氨基試劑偶聯(lián)到所述基質材料表面的辛基琥珀酸酐。

2.如權利要求1所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質，其特征在于，所述基質材料為瓊脂糖凝膠介質，優(yōu)選為交聯(lián)瓊脂糖凝膠介質。

3.如權利要求1或2所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質，其特征在于，所述雙氨基試劑包括己二胺、戊二胺、丁二胺或辛二胺中的任意一種。

4.如權利要求1-3中任一項所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質，其特征在于，所述基質材料為經(jīng)過活化劑活化的基質材料，所述活化劑包括環(huán)氧氯丙烷、環(huán)氧溴丙烷、乙二醇雙縮水甘油醚、1,4丁二醇縮水甘油醚、烯丙基縮水甘油醚或一縮二乙二醇雙縮水甘油醚中的任意一種。

5.如權利要求1-4中任一項所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質，其特征在于，所述辛基琥珀酸酐的偶聯(lián)密度為：每mL白蛋白靜電親和雙模式層析介質中含有15-100μmol的辛基琥珀酸酐。

6.如權利要求1-5中任一項所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括如下步驟：

(1)將基質材料進行活化處理，得到活化的層析基質；

(2)將步驟(1)得到的活化的層析基質與雙氨基試劑進行偶聯(lián)反應，得到偶聯(lián)雙氨基試劑的層析基質；

(3)將步驟(2)得到的偶聯(lián)雙氨基試劑的層析基質與辛基琥珀酸酐進行反應，得到所述白蛋白靜電親和雙模式層析介質。

7.如權利要求6所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述活化處理使用的活化劑包括1,4丁二醇縮水甘油醚，其與基質材料的體積比為1:(3-5)；

優(yōu)選地，步驟(1)所述活化處理在堿性環(huán)境中進行；

優(yōu)選地，步驟(1)所述活化處理的溫度為35-45℃，時間為1.5-2.5h；

優(yōu)選地，步驟(1)所述活化在150-200rpm搖床中進行；

優(yōu)選地，步驟(1)進行活化處理前將基質材料先經(jīng)去離子水洗滌，進行活化處理后將反應產物再經(jīng)去離子水洗滌。

8.如權利要求6或7所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述雙氨基試劑包括20-50mM的乙二胺溶液；

優(yōu)選地，步驟(2)所述活化的層析基質與雙氨基試劑的體積比為1:(1-2)；

優(yōu)選地，步驟(2)所述偶聯(lián)反應的溫度為30-50℃，時間為2-4h；

優(yōu)選地，步驟(2)所述偶聯(lián)反應在150-200rpm搖床中進行；

優(yōu)選地，步驟(2)所述偶聯(lián)反應完成后產物依次用去離子水、NaCl水溶液、乙酸鈉水溶液和PBS緩沖液洗滌。

9.如權利要求6-8中任一項所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質的制備方法，其特征在于，步驟(3)具體包括：將步驟(2)得到的偶聯(lián)雙氨基試劑的層析基質與二惡烷水溶液混合后，向其中逐滴滴加辛基琥珀酸酐-二惡烷溶液，反應，得到所述白蛋白靜電親和雙模式層析介質；

優(yōu)選地，所述偶聯(lián)雙氨基試劑的層析基質與二惡烷水溶液的體積比為1:(1-3)；

優(yōu)選地，所述辛基琥珀酸酐-二惡烷溶液的質量體積濃度為5-20％；

優(yōu)選地，所述反應的體系pH維持在7-9；

優(yōu)選地，所述反應的溫度為20-30℃，時間為2-5h；

優(yōu)選地，所述反應完成后產物依次用二惡烷水溶液、去離子水、NaCl水溶液、乙酸鈉水溶液和PBS緩沖液洗滌。

10.如權利要求1-5中任一項所述的白蛋白靜電親和雙模式層析介質在白蛋白分離中的應用。