[發明專利]一種黃草烏胚狀體的誘導培養方法有效
| 申請號： | 202010764866.5 | 申請日： | 2020-08-03 |
| 公開（公告）號： | CN111802248B | 公開（公告）日： | 2022-09-20 |
| 發明（設計）人： | 李昆志;李一果 | 申請（專利權）人： | 昆明理工大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 昆明同聚專利代理有限公司 53214 | 代理人： | 蘇蕓蕓 |
| 地址： | 650093 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 草烏 胚狀體 誘導 培養 方法 | ||
1.一種黃草烏胚狀體的誘導培養方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）珠芽選擇：選擇黃草烏生長健壯的植株，剪取葉腋間幼嫩的珠芽作為外植體；
（2）珠芽消毒：將步驟（1）選取的黃草烏珠芽在體積濃度75%的乙醇溶液中消毒20～60s，用無菌水清洗4～6次，然后放入質量濃度0.1%的HgCl2溶液中消毒10～15min，再用無菌水清洗4～6次，用無菌紙吸干水分；
（3）愈傷組織誘導：將步驟（2）消毒后的黃草烏珠芽接入固體培養基中，在培養溫度為20～25℃、每天光照6～12h、光照強度2500～3500lx的條件下進行培養，培養15～25d，獲得愈傷組織；
所述固體培養基配方為：MS培養基中添加2,4-二氯苯氧乙酸1.0～2.0mg/L、激動素0.1～0.5mg/L、聚乙烯吡咯烷酮1.0～3.0g/L、瓊脂5.0～6.5g/L、蔗糖20～40g/L，培養基pH值為5.8～6.6；
（4）胚狀體誘導：從步驟（3）愈傷組織中選取顏色為帶綠色的鵝黃色、分裂旺盛的胚性愈傷組織，接入固體誘導培養基中，在培養溫度為20～25℃、每天光照6～12h、光照強度2500～3500lx的條件下誘導產生胚狀體；
所述固體誘導培養基配方為：MS培養基中添加2,4-二氯苯氧乙酸1.5～1.8mg/L、激動素0.3～0.5 mg/L、聚乙烯吡咯烷酮1.0～3.0g/L、瓊脂5.0～6.5g/L、蔗糖20～40g/L，培養基pH值為5.8～6.0；
（5）胚狀體培養：選取步驟（4）中獲得的帶綠色的胚狀體，接入固體擴大培養基中，在培養溫度為20～25℃、每天光照6～12h、光照強度2500～3500lx的條件下擴大培養胚狀體；
所述固體擴大培養基配方為：MS培養基中添加2,4-二氯苯氧乙酸1.0～1.5mg/L、激動素0.1～0.5mg/L、聚乙烯吡咯烷酮1.0～3.0g/L、瓊脂5.0～6.5g/L、蔗糖20～40g/L，培養基pH值為5.8～6.0。
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