[發(fā)明專利]抗TIM3的單鏈抗體及其在制備治療腫瘤的藥物中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010760969.4
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN113214396B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張偉;江濤;翟優(yōu);李冠璋
• 申請（專利權(quán)）人: 北京市神經(jīng)外科研究所
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京英創(chuàng)嘉友知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11447
• 代理人: 耿超

本公開涉及一種抗TIM3的單鏈抗體，該抗TIM3的單鏈抗體的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。表達(dá)抗TIM3的單鏈抗體的T淋巴細(xì)胞能夠有效殺傷腫瘤細(xì)胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種靶向TIM3的嵌合抗原受體、其編碼核酸、表達(dá)載體、細(xì)胞、藥物組合物和它們的用途。

背景技術(shù)

嵌合抗原受體(Chimeric antigen receptor，CAR)是人工合成的T細(xì)胞受體，由抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域組成。抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域位于T細(xì)胞膜外，包括單鏈抗體或配體，用于特異性地結(jié)合靶抗原。胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域位于T細(xì)胞膜內(nèi)，用于向T細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)信號以刺激T細(xì)胞產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

CAR能夠靶向識別腫瘤細(xì)胞表面的靶抗原，因此，表達(dá)CAR的T細(xì)胞能夠用于靶向殺傷腫瘤細(xì)胞。然而，現(xiàn)有的表達(dá)嵌合抗原受體CAR的T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力仍然較弱。

發(fā)明內(nèi)容

本公開的目的是克服現(xiàn)有的表達(dá)嵌合抗原受體CAR的T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力仍然較弱的問題，提供一種抗TIM3的單鏈抗體。

為了實現(xiàn)上述目的，第一方面，本公開提供一種抗TIM3的單鏈抗體，該抗TIM3的單鏈抗體的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。

第二方面，本公開提供一種核酸，該核酸編碼第一方面所述的抗TIM3的單鏈抗體；優(yōu)選地，所述核酸具有SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

第三方面，本公開提供一種融合蛋白，所述融合蛋白含有依次連接的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域；所述胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列包括第一方面所述的抗TIM3的單鏈抗體的氨基酸序列；

優(yōu)選地，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包括抗CD44的單鏈抗體和/或抗CD133的單鏈抗體，所述胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域包括抗TIM3的單鏈抗體；

更優(yōu)選地，所述融合蛋白具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

第四方面，本公開提供一種融合核酸，所述融合核酸編碼第三方面所述的融合蛋白；

優(yōu)選地，所述融合核酸具有SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。

第五方面，本公開提供一種表達(dá)載體，所述表達(dá)載體插入有表達(dá)框，所述表達(dá)框包括編碼抗原結(jié)合分子的第一核酸片段和編碼胞內(nèi)信號傳導(dǎo)分子的第二核酸片段，所述胞內(nèi)信號傳導(dǎo)分子中含有第一方面所述的抗TIM3的單鏈抗體，所述第一核酸片段與所述第二核酸片段之間插入有IRES元件或2A肽編碼序列；

優(yōu)選地，所述表達(dá)框為第四方面所述的融合核酸。

第六方面，本公開提供一種表達(dá)嵌合抗原受體的細(xì)胞，該表達(dá)嵌合抗原受體的細(xì)胞由宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)染第五方面所述的表達(dá)載體后得到，所述嵌合抗原受體中含有第一方面所述的抗TIM3的單鏈抗體。

可選地，所述宿主細(xì)胞為T細(xì)胞。

第七方面，本公開提供第一方面所述的抗TIM3的單鏈抗體、第二方面所述的核酸、第三方面所述的融合蛋白、第四方面所述的融合核酸、第五方面所述的表達(dá)載體、第六方面所述的表達(dá)嵌合抗原受體的細(xì)胞在制備治療腫瘤的藥物中的用途。

可選地，所述腫瘤為腦膠質(zhì)瘤。

第八方面，本公開提供一種藥物組合物，該藥物組合物的有效成分包括第六方面所述的表達(dá)抗TIM3嵌合抗原受體的細(xì)胞。

通過上述技術(shù)方案，本公開提供的抗TIM3的單鏈抗體，能夠有效提升T淋巴細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力，因此，表達(dá)抗TIM3的單鏈抗體的T淋巴細(xì)胞能夠有效殺傷腫瘤細(xì)胞。

本公開的其他特征和優(yōu)點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細(xì)說明。