[發明專利]一種合成GHK醋酸鹽的方法

在審

• 申請號: 202010760344.8
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111690037A
• 公開（公告）日: 2020-09-22
• 發明（設計）人: 陳海佳;陳東煌;王小燕;岳坤;姜交華;羅日朗
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司;廣州賽萊拉生物基因工程有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/06;C07K1/18
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 黃忠

本發明屬于多肽合成技術領域，尤其涉及一種合成GHK醋酸鹽的方法。本發明合成GHK醋酸鹽的方法采用常規市售保護氨基酸，容易獲得，轉產有保障，采用活化酯法形成酰胺鍵，全保護氨基酸自肽序C端逐個偶聯至肽序N端，合成過程采用的反應均為溫和反應，避免了諸多不利副反應；同時采用醋酸掛柱處理的陰離子交換樹脂進行離子交換得到GHK醋酸鹽，可避免產物三氟乙酸根的存在，保障了產品的安全性，適合工業放大生產，無需使用昂貴設備，可有效控制成本。

技術領域

本發明屬于多肽合成技術領域，尤其涉及一種合成GHK醋酸鹽的方法。

背景技術

GHK(glycyl-L-histidyl-L-lysine，藍銅勝肽小分子肽)存在于人的血液、唾液和尿液中，由美國科學家LorenPickart等于1973年發現。GHK作用于真皮層，能促進細胞外基質如I型膠原蛋白和III型膠原蛋白、彈性蛋白及結構糖蛋白如層黏連蛋白和纖維連接蛋白的合成，促進傷口恢復和組織更新重建，加強真皮層，使皮膚變得更厚，緊致，皺紋得到舒緩，對抗紫外線照射的能力更強。因此，GHK及其銅絡合物和修飾后產物被廣泛用于功能性化妝品。GHK是重要的化妝品功能性活性物，也是制備銅肽的重要原料。

目前，GHK功效評價的報道甚多，都已驗證功效真實性，而在其制備工藝方面，也有針對性開發，但多存在各種弊端。公開號CN103665102A專利通過采用親脂性保護基改變中間體的親脂性使工藝過程更好操作、產率提升，但是工藝使用非常規市售保護氨基酸，需為氨基酸上保護，路線步驟多，工藝鏈長，并且最終產物未進行脫三氟乙酸根處理，具有毒害性，不利于應用；公開號CN107098950A專利通過酰氯與硅烷保護的組氨酸反應得到相應的氯取代二肽，與三氟乙酸酐反應得到三氟乙酰基保護物，再與酰氯化試劑反應制成相應的酰氯產物，然后與三氟乙酰賴氨酸反應得到相應的氯取代三肽，最后氨解并脫去三氟乙酰基得到GHK或AHK，但是工藝使用非常規市售保護氨基酸，氨水氨解去保護，過程中反應條件都較劇烈，容易造成氨基酸消旋；公開號CN107778349A專利則使用Trt基團保護氨基，醋酸脫保護來降低工藝成本，但Trt基團不容易脫除干凈，并且原子經濟性不好，也無工業化市售原料，需定制。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種合成GHK醋酸鹽的方法，用于解決現有合成方法原料需定制、存在工藝受限的問題，并且，采用醋酸掛柱處理的陰離子交換樹脂進行離子交換得到GHK醋酸鹽，可避免產物三氟乙酸根的存在，保障了產品的安全性。

本發明的具體方案如下：

一種合成GHK醋酸鹽的方法，包括以下步驟：

a)通過碳二亞胺類縮合劑作用，將Boc-Gly與HOSU和/或HONB進行活化反應得到Boc-Gly活化酯；

b)將所述Boc-Gly活化酯與H-His(Trt)-OH和/或H-His(Boc)-OH溶于惰性溶劑在堿性條件下反應得到Boc-Gly-His(Trt)-OH和/或Boc-Gly-His(Boc)-OH；

c)將所述Boc-Gly-His(Trt)-OH和/或所述Boc-Gly-His(Boc)-OH在極性有機溶劑中與碳二亞胺類縮合劑和縮合輔劑反應進行活化反應，再將活化產物與溶解在碳酸鹽水溶液中的H-Lys(Boc)-OH進行縮合反應，得到Boc-Gly-His(Trt)-Lys(Boc)-OH和/或Boc-Gly-His(Boc)-Lys(Boc)-OH；

d)將所述Boc-Gly-His(Trt)-Lys(Boc)-OH和/或所述Boc-Gly-His(Boc)-Lys(Boc)-OH脫保護，再通過醋酸掛柱處理的陰離子交換樹脂進行離子交換得到GHK醋酸鹽。