[發明專利]一種合成GHK醋酸鹽的方法

在審

• 申請號: 202010760344.8
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111690037A
• 公開（公告）日: 2020-09-22
• 發明（設計）人: 陳海佳;陳東煌;王小燕;岳坤;姜交華;羅日朗
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司;廣州賽萊拉生物基因工程有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/06;C07K1/18
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 黃忠

1.一種合成GHK醋酸鹽的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a)通過碳二亞胺類縮合劑作用，將Boc-Gly與HOSU和/或HONB進行活化反應得到Boc-Gly活化酯；

b)將所述Boc-Gly活化酯與H-His(Trt)-OH和/或H-His(Boc)-OH溶于惰性溶劑在堿性條件下反應得到Boc-Gly-His(Trt)-OH和/或Boc-Gly-His(Boc)-OH；

c)將所述Boc-Gly-His(Trt)-OH和/或所述Boc-Gly-His(Boc)-OH在極性有機溶劑中與碳二亞胺類縮合劑和縮合輔劑反應進行活化反應，再將活化產物與溶解在碳酸鹽水溶液中的H-Lys(Boc)-OH進行縮合反應，得到Boc-Gly-His(Trt)-Lys(Boc)-OH和/或Boc-Gly-His(Boc)-Lys(Boc)-OH；

d)將所述Boc-Gly-His(Trt)-Lys(Boc)-OH和/或所述Boc-Gly-His(Boc)-Lys(Boc)-OH脫保護，再通過醋酸掛柱處理的陰離子交換樹脂進行離子交換得到GHK醋酸鹽。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a)所述碳二亞胺類縮合劑選自DCC、EDC或DIC；

步驟a)所述Boc-Gly、所述HOSU和/或HONB與所述碳二亞胺類縮合劑的摩爾比為1:(1～1.5):(1.1～2)。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a)所述活化反應的溫度為-10～35℃，所述活化反應的時間為4～16h。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)所述惰性溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃或乙酸乙酯；

步驟b)所述堿性條件中的堿為有機季胺堿；

步驟b)所述Boc-Gly活化酯、所述H-His(Trt)-OH和/或H-His(Boc)-OH與所述堿的摩爾比為1:(0.95～1.05):(2.5～3.5)。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)所述反應的溫度為-10～25℃，所述反應的時間為5～24h。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c)所述極性有機溶劑為1,4-二氧六環和/或DMF；

步驟c)所述碳二亞胺類縮合劑選自DCC、EDC或DIC；

步驟c)所述縮合輔劑選自HOSU、HONB或HOBT；

步驟c)所述碳酸鹽水溶液中的碳酸鹽選自碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀或碳酸鉀。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟c)所述Boc-Gly-His(Trt)-OH和/或所述Boc-Gly-His(Boc)-OH、所述縮合輔劑、所述碳二亞胺類縮合劑、所述碳酸鹽和所述H-Lys(Boc)-OH的摩爾比為1:(1～1.5):(1～2):(2～3):(1.05～1.6)。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c)所述活化反應的溫度為-10～25℃，所述活化反應的時間為5h～16h；

步驟c)所述縮合反應的溫度為0～25℃。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟d)所述脫保護具體為采用三氟乙酸和捕捉劑組合或濃鹽酸與醋酸組合進行攪拌反應脫去保護。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟d)所述離子交換之后，所述得到GHK醋酸鹽之前，還包括：

將離子交換產物進行濃縮和析晶。