[發明專利]一種研究雞生殖細胞自噬的方法在審
| 申請號： | 202010748580.8 | 申請日： | 2020-07-30 |
| 公開（公告）號： | CN111850082A | 公開（公告）日： | 2020-10-30 |
| 發明（設計）人： | 左其生;丁穎;李碧春;姜景譯;袁霞;石祥;張明;張亞妮;孫紅艷 | 申請（專利權）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02;G01N33/68 |
| 代理公司： | 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222 | 代理人： | 沈志海 |
| 地址： | 225009 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 研究 生殖細胞 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種研究雞生殖細胞自噬的方法，其特征是，包括：
1）設置GFP-LC3慢病毒載體的MOI值梯度轉染生殖細胞；
2）收集各組樣品，EdU檢測不同MOI值組細胞的增殖效率；
3）通過Western-Blot檢測游離的GFP蛋白和自噬標志蛋白LC3-Ⅰ與LC3-Ⅱ之間的轉化和比例。
2.根據權利要求1所述的一種研究雞生殖細胞自噬的方法，其特征是，所述步驟1），具體操作：在生殖細胞中添加雷帕霉素激活細胞自噬，轉染不同MOI值的GFP-LC3慢病毒載體，在顯微鏡下觀察細胞生長狀態，排除MOI值過高導致細胞凋亡的分組。
3.根據權利要求2所述的一種研究雞生殖細胞自噬的方法，其特征是，所述步驟3），通過western-blot檢測游離的GFP蛋白和自噬標志蛋白LC3-Ⅰ與LC3-Ⅱ之間的轉化和比例及熒光顯微鏡定位LC3蛋白在細胞中的表達情況綜合評判該MOI值在雞生殖細胞中的適用性。
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