[發(fā)明專利]一種酶切探針恒溫檢測結(jié)核分枝桿菌核酸的試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010733483.1 | 申請日: | 2020-07-27 |
| 公開(公告)號: | CN111793703B | 公開(公告)日: | 2023-09-22 |
| 發(fā)明(設計)人: | 劉利成;王華貴;劉艷;馮華華;王鵬志 | 申請(專利權)人: | 江蘇宏微特斯醫(yī)藥科技有限公司;北京宏微特斯生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京玄法律師事務所 16002 | 代理人: | 潘滿根 |
| 地址: | 226400 江蘇省南通市如東縣掘*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 探針 恒溫 檢測 結(jié)核 分枝桿菌 核酸 試劑盒 | ||
1.一種酶切探針恒溫檢測結(jié)核分枝桿菌核酸的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括:檢測結(jié)核分枝桿菌IS6110基因等溫擴增引物和相應可被RNaseH酶切的探針;檢測結(jié)核分枝桿菌Pab基因的等溫擴增引物和相應可被RNaseH酶切的探針;
所述檢測結(jié)核分枝桿菌IS6110基因等溫擴增引物SEQ?ID?NO.1-SEQ?ID?NO.6和相應可被RNaseH酶切的探針是SEQ?ID?NO.7,該探針中包括一個RNA堿基,斜體下劃線所顯示的堿基為RNA堿基,
所述檢測結(jié)核分枝桿菌Pab基因等溫擴增引物SEQ?ID?NO.8-SEQ?ID?NO.13和相應可被RNaseH酶切的探針是SEQ?ID?NO.14,該探針中包括一個RNA堿基,斜體下劃線所顯示的堿基為RNA堿基,
2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括:檢測一段人工合成且與結(jié)核分枝桿菌核酸及人源核酸均非同源的內(nèi)參基因等溫擴增引物SEQ?ID?NO.15-SEQID?NO.20和相應可被RNaseH酶切探針SEQ?ID?NO.21,該探針中包括一個RNA堿基,斜體下劃線所顯示的堿基為RNA堿基,
3.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,檢測結(jié)核分枝桿菌IS6110基因、結(jié)核分枝桿菌Pab基因和外源內(nèi)參基因的檢測引物中的IF:IB:LF:LB:OF:OR的使用比例為8:8:4:4:1:1。
4.根據(jù)權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,三個檢測基因的IF與IB引物的使用濃度為0.8μM,LF與LB引物的使用濃度為0.4μM,OF與OR引物的使用濃度為0.1μM。
5.根據(jù)權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中檢測IS6110基因與Pab基因的探針SEQ?ID?NO:7和SEQ?ID?NO:14所標記的熒光基團與檢測內(nèi)參基因的探針SEQ?IDNO:21標記的熒光基團不同。
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