[發明專利]玉米植株紋枯病發病的方法有效
| 申請號： | 202010729342.2 | 申請日： | 2020-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN111849786B | 公開（公告）日： | 2021-12-03 |
| 發明（設計）人： | 彭緒冰;彭緒偉;覃遠照;李大偉;彭緒朋;彭勇宜;劉宗坤;彭飛宜;彭緒東;張宏林;田文華;向慧玲 | 申請（專利權）人： | 湖北康農種業股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;A01G7/06;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重慶中之信知識產權代理事務所(普通合伙) 50213 | 代理人： | 覃詩龍 |
| 地址： | 443500 湖北省宜*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 玉米 植株 紋枯病 發病 方法 | ||
1.一種玉米植株紋枯病發病的方法，其特征在于，包括：
S1、紋枯病菌的獲取：取玉米紋枯病發病株莖和葉的病健交叉部位帶病斑的組織，消毒去除雜菌，水洗、吸干水分，第一培養基培養，至組織長出菌絲；挑取組織的邊緣長出的菌絲頂端，于PDA斜面培養基上培養，備用；
S2、紋枯病菌的純化：無菌水沖洗S1中制備的菌體產生的孢子，并將所述孢子的濃度稀釋為108CFU/mL，然后取80～200mL稀釋后的懸浮液涂覆于瓊脂培養基，培養；切下帶有單孢子的瓊脂培養基，并將單孢子移植到第二培養基上培養，備用；
S3、紋枯病菌的擴大培養：將S2中的所述第二培養基置于黑暗的環境下培養；
S4、紋枯病菌的植株接種：將S3中備用的菌種培養液用無菌水稀釋，并配置濃度為103～106個/mL的分生孢子濾液，備用；于田間選取玉米植株處于大喇叭口期的幼苗，取3～5ml稀釋后的菌液注射于幼苗第三葉與莖稈相連的葉鞘處；玉米紋枯病發病環境培養，得發紋枯病的玉米植株；
其中，所述第一培養基和所述第二培養基均為PDA培養基。
2.如權利要求1所述的玉米植株紋枯病發病的方法，其特征在于，在S1中，所述消毒殺死雜菌，水洗、吸干水分的具體步驟包括：
將帶有病斑的組織先于乙醇中浸泡10～20秒，然后移入質量分數為0.1％～0.3％的升汞溶液中浸泡2～6分鐘，以消毒去除雜菌；
將消毒后的組織轉入蒸餾水中洗滌3次，吸水紙吸干水分。
3.如權利要求2所述的玉米植株紋枯病發病的方法，其特征在于，所述PDA培養基的組分包括馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、水；其中，所述馬鈴薯、所述葡萄糖、所述瓊脂及所述水的質量之比為200:10～20:17～20:1000。
4.如權利要求3所述的玉米植株紋枯病發病的方法，其特征在于，在S1中，所述第一培養基培養的具體步驟包括：
將所述第一培養基于25℃條件下靜置培養3～5天。
5.如權利要求3所述的玉米植株紋枯病發病的方法，其特征在于，在S4中，所述玉米紋枯病發病環境具體為：
所述玉米紋枯病發病的環境溫度為25～30℃，相對濕度為80～95％。
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