[發明專利]從羅漢果提取渣中分離角鯊烯等多種活性成分的方法

有效

• 申請號: 202010728500.2
• 申請日: 2020-07-27
• 公開（公告）號: CN111848708B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 李偉;黃華學
• 申請（專利權）人: 湖南華誠生物資源股份有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08;C07C11/21;C07C7/00;C07J9/00
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所(普通合伙) 43205
• 代理人: 王艷;寧星耀

1.從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）堿性低碳醇提取：將羅漢果提取渣破碎，加入堿性低碳醇/水溶液，室溫避光攪拌提取，過濾，得提取濾液；

所述羅漢果提取渣是指羅漢果鮮果或干果用水提取羅漢果甜苷之后的廢渣，包括羅漢果果籽和羅漢果果殼；

所述堿性低碳醇/水溶液中的低碳醇為甲醇、乙醇和異丙醇中的一種或幾種，低碳醇的體積分數為40%～99%；每1kg羅漢果提取渣加入5～10L堿性低碳醇/水溶液；

所述堿性低碳醇中的堿為氫氧化鈉或氫氧化鉀，所述堿性低碳醇中堿的質量百分比濃度為0.5%～2%，所述室溫避光攪拌提取的時間為6～8小時；

（2）粗提物的干燥：將步驟（1）所得提取濾液用酸中和，減壓濃縮至無醇，往濃縮液中加入層析硅膠，攪拌均勻，真空干燥至恒重，得粗提物拌樣硅膠；

（3）角鯊烯的分離和純化：將步驟（2）所得粗提物拌樣硅膠投入二氧化碳超臨界萃取器中，通入含有夾帶劑的二氧化碳氣體進行萃取，萃取結束后，降溫減壓至常溫常壓，得初萃物；初萃物先用有機溶劑稀釋溶解，再用堿水反萃取，將有機溶劑層用水洗至中性，分液，有機層加入硅藻土，攪拌，過濾，減壓濃縮至無溶劑，得角鯊烯成品和經超臨界萃取后的拌樣硅膠；

所述萃取的溫度為35～45℃，壓力為20～28MPa，時間為1～2小時；所述夾帶劑為甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、環己烷、正己烷和水中的一種或幾種，所述夾帶劑的加入量為羅漢果提取渣的0.01%～0.1%；

（4）硅膠柱分離：取步驟（3）經超臨界萃取后的拌樣硅膠，投入硅膠層析柱中，依次用洗脫劑I和洗脫劑II對硅膠柱進行洗脫，分別收集洗脫液I和洗脫液II；

所述洗脫劑I是體積比為9～10:1的二氯甲烷與甲醇的混合溶液，洗脫劑I的用量為3～5BV，使用洗脫劑I洗脫的流速為0.5～1.0 BV/小時；所述洗脫劑II是體積比為6～8:1的二氯甲烷與甲醇的混合溶液，洗脫劑II的用量為3～5BV，使用洗脫劑II洗脫的流速為0.5～2.0 BV/小時；

（5）谷甾醇的分離和純化：將洗脫液I減壓濃縮至無溶劑，干燥，得谷甾醇粗品；將谷甾醇粗品用脂溶性有機溶劑溶解，加入硅藻土，攪拌回流，趁熱過濾，濃縮，將濃縮液冷卻，攪拌析晶，抽濾，濾餅干燥，得谷甾醇成品；

所述濃縮液的固形物濃度為10%～20%，所述冷卻的溫度為5～10℃，所述攪拌的速度為20～60 r/min，所述析晶的時間為8～24小時；

（6）羅漢果黃素的分離和純化：將洗脫液II加入中性氧化鋁，攪拌回流，趁熱過濾，濃縮，干燥，得羅漢果黃素成品。

2.根據權利要求1所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述的酸為無機酸。

3.根據權利要求2所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，所述無機酸為鹽酸或硫酸。

4.根據權利要求1～3任一項所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，步驟（2）中，每1kg羅漢果提取渣加入0.1～0.2L層析硅膠。

5.根據權利要求1～3任一項所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述有機溶劑為石油醚、乙醚、正己烷、環己烷、6#溶劑油、120#溶劑油、乙酸乙酯中的一種或幾種，每千克濕羅漢果提取渣中加入0.05～2L有機溶劑。

6.根據權利要求4所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述有機溶劑為石油醚、乙醚、正己烷、環己烷、6#溶劑油、120#溶劑油、乙酸乙酯中的一種或幾種，每千克濕羅漢果提取渣中加入0.05～2L有機溶劑。

7.根據權利要求1～3任一項所述從羅漢果提取渣中分離角鯊烯、谷甾醇和羅漢果黃素的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述硅藻土的用量為濕羅漢果提取渣重量的1‰～5‰。