[發明專利]尿激酶原及其變體在病毒引起的凝血疾病中的應用

在審

• 申請號: 202010726926.4
• 申請日: 2020-07-26
• 公開（公告）號: CN113975381A
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 劉建寧
• 申請（專利權）人: 劉建寧
• 主分類號: A61K38/49
• 分類號: A61K38/49;A61K9/19;A61K47/26;A61P7/02;A61P31/12;A61P31/14;A61P9/10;A61P11/00;A61P9/14
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本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及尿激酶原及其變體在病毒引起的凝血疾病中的應用。研究發現，在病毒感染的患者中使用預防劑量的尿激酶原及其變體，在不增加出血風險的前提下，能夠有效地阻止血栓凝塊的形成，從而有效地預防病毒導致的彌散性血管內凝血、ST段抬高型心肌梗死、缺血性卒中、肺栓塞、深靜脈血栓和靜脈血栓栓塞癥等凝血相關疾病。當病毒感染導致患者產生血栓形成后，利用治療劑量的尿激酶原及其變體對患者進行溶栓治療，能夠有效地溶解血栓，降低其帶來的致死致殘風險。本發明從預防和治療兩方面，充分說明了尿激酶原及其變體在病毒感染中引起凝血疾病時，降低病毒對患者造成的損害以及可能的后遺癥，并提高患者的生存率。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及尿激酶原及其變體在病毒引起的凝血疾病中的應用。

背景技術

人尿激酶原(如無說明，本文中所用名詞“尿激酶原”特指“人尿激酶原”)系由411個氨基酸組成的單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑(附圖1)。尿激酶原的蛋白結構主要分為3個部分，分別為表皮生長因子類似結構域、環狀結構域和蛋白水解酶結構域，其中蛋白酶水解結構域負責激活纖溶酶原，發揮溶栓作用。尿激酶原存在一種LMW-prouk變體形式(低分子量尿激酶原)，僅包含尿激酶原3個蛋白結構中單一的蛋白水解酶結構域，即氨基酸序列第135位以后的結構區域。M5則是一種尿激酶原的變體，它是將尿激酶原氨基酸序列中第300位賴氨酸突變為組氨酸而得到的。

2019年新型冠狀病毒(COVID-19)感染的臨床表現為多種表型，從無癥狀到深入、快速的多器官功能障礙綜合征(MODS)及死亡。COVID-19的MODS發病機制是多因素的，其中一個重要的因素是凝血相關疾病，臨床表現為高凝血狀態和血栓形成。在COVID-19患者中，彌散性血管內凝血(DIC)是死亡率的一個重要預測因子，非幸存者71.4％有DIC，而幸存者只有0.6％有DIC。在患病的第10-14天，非幸存者的D-二聚體顯著增加，纖維蛋白原減少，提示發生了凝血癥狀。更為嚴重的是，COVID-19患者中，由于病毒引起凝血和血栓形成，經常會造成ST段抬高型心肌梗死(STEMI)、缺血性卒中(IS)、肺栓塞(PE)、深靜脈血栓(DVT)和靜脈血栓栓塞癥(VTE)等嚴重凝血疾病。

雖然低分子肝素等抗凝藥物已被指導用于COVID-19患者凝血異常時的預防(見附圖2)，但據報道，接受30-40mg低分子肝素治療(皮下注射，每日一次)的重癥COVID-19患者，下肢DVT仍有極高的發生率(85.4％)(見參考文獻1)。這表明，在COVID-19重癥患者中，單靠抗凝藥可能不足以預防血栓形成。因此，在臨床應用，沒有出血風險的溶栓劑是這個致命問題的解決方案。

發明內容

分析目前所有的溶栓藥,申請人發現tPA及其衍生物、鏈激酶、尿激酶、葡激酶等溶栓劑入血后不論血管中有無血栓均會迅速激活纖溶蛋白酶原，造成全身性出血的風險。申請人通過試驗證明：僅尿激酶原及其變體是唯一適合上述臨床需求的候選藥物。尿激酶原是具有酶原和酶雙重特性的水解酶原。在生理狀態下，其作為酶原在血漿中處于惰性狀態，不會激活血液里的纖溶酶原。然而，在血管中有血栓形成時，尿激酶原能夠特異性地激活與血栓結合的纖溶酶原，這些激活的纖溶酶將血栓附近的尿激酶原又轉化為尿激酶，轉化為尿激酶后其催化活力可以提高250～500倍，進而大量激活血栓上所有結合的纖溶酶原以及血栓周圍游離的纖溶酶原，從而使血栓迅速溶解。該過程中，通過血液中的蛋白水解酶抑制劑(α-抗纖溶酶，α1巨球蛋白、PAI-1等)的作用，使該部分尿激酶與纖溶酶的作用局限于血栓附近。尿激酶原誘導的溶栓作用不同于尿激酶、鏈激酶等，具有血栓專一性。與tPA相比較，尿激酶原所具有的酶原惰性使其在接觸到栓塞血栓之前，不會消耗血液中的纖維水解酶抑制劑，從而基本上防止因激活系統性纖溶作用而導致全身性出血的副作用。

申請人通過研究發現，尿激酶原及其變體存在兩個特性：

1、尿激酶原及其變體在低于一定濃度時，在血漿中以惰性狀態存在，不具備激活纖溶酶原的活性。例證請見下文實驗1。