[發明專利]一種清達顆粒中鉤藤4種生物堿的含量測定方法

有效

• 申請號: 202010722963.8
• 申請日: 2020-07-24
• 公開（公告）號: CN111929377B
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發明（設計）人: 王協和;陳盛君;陳可冀;李松;范愷磊;杜俊潮
• 申請（專利權）人: 江陰天江藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

本發明提供了一種清達顆粒中鉤藤4種生物堿的含量測定方法，該方法包括：供試品溶液的制備、對照品溶液的制備和采用超高效液相色譜儀進行測定，其中，所述供試品溶液的制備包括取裝量差異項下的清達顆粒，研細，精密稱定，加入甲醇，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液過堿性氧化鋁柱，加洗脫溶劑進行洗脫，收集流出液及洗脫液，蒸干，殘渣加復溶溶劑進行溶解，搖勻。本發明解決了從清達顆粒充分提取鉤藤相關成分的問題，減少在檢測過程中雜質對色譜柱的損害，另外還能實現測出蓮子心的定性研究。

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，涉及清達顆粒中鉤藤4種生物堿的含量測定方法。

背景技術

高血壓是常見的心血管疾病，其并發癥是造成人類死亡的主要原因之一。近年來，高血壓的患病率迅速上升，其預防和治療現狀刻不容緩。目前，藥物治療是高血壓病最主要的治療方法，其中中藥治療在高血壓的早期防治中逐漸成為一個熱點(許紅葉,王友群.中藥在高血壓治療中的研究及應用[J].中國實用醫藥,2008,3(25):189-192)。國醫大師陳可冀院士認為高血壓發病存在由陽盛到陰陽兩虛的一個演化過程，臨床上高血壓初期多以肝陽上亢或肝火上炎為主要證候特征，故陳可冀院士在天麻鉤藤飲的基礎上加減化裁，創立了清眩降壓湯用以治療上述證型的高血壓患者。臨床研究表明：清眩降壓湯可較好地控制血壓，有效改善高血壓患者的臨床癥狀和生活質量(余軍,徐鳳芹.清眩降壓湯治療肝腎陰虛肝陽上亢型高血壓病的觀察[J].中西醫結合心腦血管病雜志,2010,8(1):1-3)。清達顆粒是由陳可冀院士根據早治防變的思路，將清眩降壓湯進行精簡而來的。清達顆粒主要由天麻、鉤藤、蓮子心、黃芩四味藥組成(CN106421447A)。鉤藤為茜草科，鉤藤屬，植物鉤藤或其同屬植物的帶鉤莖枝，性涼，味甘，歸肝、心包經，具有清涼平肝、活血通經、息風定驚等傳統功效，現有研究發現，鉤藤的主要有效成分為總生物堿，其中以鉤藤堿、異鉤藤堿為主，具有降血壓、抗心律失常以及抗血小板聚集和抗血栓形成的作用(王克英,郭思妤,祝晶等.黔產鉤藤HPLC指紋圖譜的研究[J].中國醫藥指南,2012,10(35):69-70)。目前，隨著醫藥科技的發展，鉤藤的開發研究不斷深入，功能效用也在不斷擴大，已越來越受到人們關注。因此，利用鉤藤制成的具有降血壓、抗心律失常等治療各種病癥的復方制劑越來越多，如潛陽降壓膠囊、天鉤靈膠囊等，特別是進幾年來利用鉤藤提取制成的鉤藤堿靜脈注射液，具有抗腦血栓的作用。因此，為了保證用藥安全以及滿足藥效使用，鉤藤的含量檢測越來越重要。

目前鉤藤總生物堿含量測定法包括滴定法、直接紫外分光度法、酸性染料法、高效液相色譜法等。其中滴定法、直接紫外分光光度法和酸性染料比色法所測得的結果準確性存在較大的爭議，而高效液相色譜法(HPLC)已被很好地應用于鉤藤堿、異鉤藤堿的含量分析。但檢測的精密度、準確度還有待進一步提高，另外HPLC法在進行含量測定時，所耗時間長，大約20min左右才能完成一次色譜分析，也提高了檢測成本。由于科技的進步以及技術水平的提高，鉤藤的含量檢測也出現了一些新型的檢測方法：高效毛細管電泳法、非水毛細管電泳法和氣相色譜法等。以上三種含量測定方法均可以快速有效地分離并同時測定鉤藤中鉤藤堿、異鉤藤堿的含量，但這些測定方法操作復雜，且目前應用并不多。同時供試液的制備方法過程非常復雜，難度較大，還需要用到三氯甲烷等毒性較強的試劑，容易造成安全隱患。此類方法還需進一步驗證與優化方可普及。