[發明專利]一種檢測醇類溶液中內毒素的方法

在審

• 申請號: 202010722657.4
• 申請日: 2020-07-24
• 公開（公告）號: CN111856017A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 毛斌杰;褚培忠;陳杭
• 申請（專利權）人: 褚培忠
• 主分類號: G01N33/579
• 分類號: G01N33/579;G01N33/68
• 代理公司: 杭州凌通知識產權代理有限公司 33316
• 代理人: 王瓊

本發明公開了一種檢測醇類溶液中內毒素的方法，通過加熱醇類溶液而后用鱟試劑檢測法對處理后的醇類溶液進行內毒素檢測；通過加熱蒸發法，在不減少內毒素的前提下，對溶液中的醇類盡量多的取出；本發明通過加熱醇類溶液，然后用鱟試劑檢測法對處理后的醇類溶液進行內毒素檢測，在現有技術技術支持的基礎上，結合自身的方式拓展，提高檢測的針對性；利用加熱蒸發法，在不減少內毒素的前提下，盡量取出溶液中的醇類，減少檢測溶液內部的整體醇類含量，提高裝置的整體檢測精準性，減少醇類含量對檢測結果的影響。

技術領域

本發明涉及醇類溶液內毒素檢測方法技術領域，具體為一種檢測醇類溶液中內毒素的方法。

背景技術

細菌內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖和微量蛋白的復合物，它的特殊性不是細菌或細菌的代謝產物，而是細菌死亡或解體后才釋放出來的一種具有內毒素生物活性的物質。內毒素的危害是非常嚴重的，它會引起：1.發熱反應：人體對于細菌內毒素極為敏感。極微量(1～5ng/kg)內毒素就能引起體溫上升；2.白細胞反應：細菌內毒素進入宿主體內以后，由于細胞發生移動并黏附到組織毛細血管上，血流中占白細胞總數60％～70％的中性粒細胞數量迅速減少；3.內毒素休克：大量內毒素作用于機體的巨噬細胞、中性粒細胞以及補體系統和凝血系統等，會導致微循環障礙，出現微循環衰竭、低血壓、缺氧、酸中毒等，于是導致病人休克。因此，生物制品類、注射用藥劑、化學藥品類、放射性藥物、抗生素類、疫苗類、透析液等制劑以及醫療器材類(如一次性注射器，植入性生物材料)必須經過細菌內毒素檢測試驗合格后才能使用。

生物制藥中的每一個環節都有可能污染內毒素使產品不合格，不僅給生產企業造成很大的經濟損失，也會直接影響該企業的信譽和形象。隨著國家藥監部門對生物制品質量的要求不斷提高，對內毒素的要求也越來越高。

生物制品中內毒素的來源主要有：菌毒種、生產環境、不規范操作、設備及器械、原輔材料等。對于生物制品生產中內毒素污染的控制最主要的措施是生產過程控制，即嚴格按GMP要求進行生產，嚴格無菌操作，防止內毒素產生。

細菌內毒素最常用的檢查法一般是鱟試劑試驗法，1964年由美國學者Levin和Bang發現微量革蘭氏陰性菌內毒素也可以引起凝膠反應，從而在1968年創立了一種定性或定量檢測微量細菌內毒素的體外分析方法(鱟試劑檢測法)。其檢測原理是：鱟體內有一種變形細胞，細胞內中血藍蛋白，一旦接觸到細菌的內毒素，就會激活蛋白凝固原，導致凝集現象的發生。鱟試劑檢測法操作簡便，所以得到廣泛的使用，但是鱟試劑法的前提是要排除待測溶液中某種成分對鱟試劑靈敏度的干擾。

醇類消毒劑或醇類原料在生物制藥行業中是經常會被用到的。這就要求當醇類作為原輔料，以及作為A/B級潔凈區消毒劑時，必須檢測內毒素含量，當內毒素含量過高時必須采取一定的措施消除內毒素。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測醇類溶液中內毒素的方法，通過加熱醇類溶液，然后用鱟試劑檢測法對處理后的醇類溶液進行內毒素檢測。因為醇類會對內毒素檢測有很大的干擾，醇類會導致鱟試劑與內毒素接觸后無法凝結，容易使檢測結果產生假陰性。內毒素對熱的耐受性非常強。常用的濕熱滅菌法(121℃，1h)不能破壞內毒素。破壞內毒素生物活性的最有效方法是干熱滅菌法。一般180℃3～4h、200℃60min或250℃30～45min，或用強堿強酸才能徹底破壞它。內毒素強大的耐熱性，本方法考慮用加熱蒸發法，在不減少內毒素的前提下，盡量去除溶液中的醇類。加熱醇與水的混合物，醇類的揮發速度會高于水(比如制造燒酒的時候把釀好的酒上鍋蒸，收集蒸汽得到燒酒(酒精的含量較高))。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種檢測醇類溶液中內毒素的方法,包括如下步驟：